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更新時間:2017-07-07 12:38:20瀏覽次數(shù):144次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總*(TC)檢測試劑盒100T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
總*(TC)檢測試劑盒100T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
總*(TC)檢測試劑盒100T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
MDA-MB-175VII(人導管癌細胞) 5×106cells/瓶×2
人表皮角質(zhì)細胞-HEK-a
TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細胞裂解液 (陽性對照)
K562細胞,人慢性髓原白血病細胞 倉鼠/小鼠雜交瘤細胞,145-2C11細胞 滑膜細胞培養(yǎng)基SM
CM-H065人輸尿管上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
AR42J(大鼠胰腺外分泌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R075大鼠主動脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基100mL 人正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1
球狀少突細胞培養(yǎng)基OsM-prf
FCGRT & B2M Others Human 人 FCGRT & B2M Heterodimer 人細胞裂解液 (陽性對照)
EC-304? 人血管內(nèi)皮細胞
CM-M054小鼠子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基100mL
HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0904 表皮角化細胞*培養(yǎng)基 100mL
PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人細胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細胞;WI-38 [WI38]
狗骨髓間質(zhì)干細胞 The dog bone marrow mesenchymal stem cells
HME7細胞,人黑色素瘤細胞 短雙歧桿菌 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;HH-29
UM-UC-3(人膀胱移行細胞癌) 5×106cells/瓶×2
HUVEC(HUV-EC-C) (人臍靜脈血管內(nèi)皮細胞) 5×106cells/瓶×2 SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人胰腺癌細胞 人癌細胞;MDA-MB-435S
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人維生素B3(VB3)免疫試劑盒 Human vitamin B3,VB3 ELISA kit
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ratProstaglandinF,PG-FELISA試劑盒大鼠前列腺素F(PGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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Humanmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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組織MSK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
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總*(TC)檢測試劑盒100T免費代測人丁肝抗原(HDV-Ag)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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