當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 總*(TBIL)檢測試劑盒100T使用說明書
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更新時間:2017-07-07 12:36:58瀏覽次數(shù):114次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)總*(TBIL)檢測試劑盒100T使用說明書使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
總*(TBIL)檢測試劑盒100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
總*(TBIL)檢測試劑盒100T使用說明書實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
LA795(小鼠肺腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人支氣管平滑肌細(xì)胞HBSMC
IFNA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 FGFR4 / FGF Receptor 4 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
RWPE1細(xì)胞,人前列腺上皮細(xì)胞 鼬肺上皮細(xì)胞,MV-1-Lu細(xì)胞 小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h
CM-H105人皮下脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R035大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL 人胚腎上皮細(xì)胞系;KiMA
CM-H068人膀胱上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
FGF18 Others Human 人 FGF18 / FGF-18 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
3T3-L1小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T3-L1 mouse embryonic fibroblasts DMEM+10%FBS
其他白細(xì)胞介素
人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞( Hac) (1×106 ) 小鼠神經(jīng)干細(xì)胞(EGFP標(biāo)記) Mouse
FANCA Others Human 人 FANCA / FACA 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚肺成纖維細(xì)胞;MRC-5
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-7
K-562細(xì)胞,慢性髓原白血病細(xì)胞 小細(xì)胞肺癌細(xì)胞,NCI-H446細(xì)胞 人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞;SW-13
KM小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤瘤株;LⅡ
BST1 Others Mouse 小鼠 CD157 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA試劑盒 ,英文名: GUSβ ELISA Kit
人維生素D(VD)ELISA檢測試劑盒HumanVitaminD,VDELISAKit 96T/48T
大鼠粘膠蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)免疫試劑盒 Rat Tenascin-C,TN-C ELISA Kit
英文名稱HumanCTX-IELISAKit人I型膠原C端肽規(guī)格:96T/48T
動物組織醛同還原酶1E(aldo-ketoreductase1E)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitLebtospira兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格:48T/96T
兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human fibronection related antigen (FRA) ELISA Kit 人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA試劑盒
Humananti-endothelialcellantibody,AECAELISAKit 人抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humandesmogleins1,DGS-E1ELISA試劑盒人橋粒芯糖蛋白-1(DGS-E1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織MAPKAPKINASE5激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
總*(TBIL)檢測試劑盒100T使用說明書人二肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人二磷酸腺苷(ADP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人二級淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人二胺氧化酶(DAO)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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