當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 神經(jīng)氨酸酶(唾液酸酶)檢測試劑盒-比色法100T使用說明書
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更新時間:2017-07-07 12:02:35瀏覽次數(shù):165次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)神經(jīng)氨酸酶(唾液酸酶)檢測試劑盒-比色法100T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
神經(jīng)氨酸酶(唾液酸酶)檢測試劑盒-比色法100T使用說明書操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
神經(jīng)氨酸酶(唾液酸酶)檢測試劑盒-比色法100T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
GH3(大鼠垂體瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
心肌細(xì)胞生長添加物CMGS
ART3 Others Human 人 ART3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
ISK (Ishikawa)細(xì)胞,人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)瘤細(xì)胞,Bv-2細(xì)胞 心肌成纖維細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0012A172(人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HOB Pellet 人成骨細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞總RNAHCPEC tRNA
BPH-1, 人前列腺增生細(xì)胞
FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人胚腎細(xì)胞;293FT
豹貓肺成纖維樣細(xì)胞;LCL4 幼倉鼠腎細(xì)胞,BHK細(xì)胞 DCS細(xì)胞,小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞
人胚胎,皮膚,肌肉;M-20
HA Others H15N8 甲型流感 H15N8 (A/duck/AUS/341/1983) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CD33 Others Mouse 小鼠 CD33 / Siglec-3 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人腦瘤細(xì)胞;SF126
MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌
IMR-32人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 IMR-32 human neuroblastoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS
THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人上皮細(xì)胞;MCF-10A 人前列腺平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠二氫*脫氫酶(DLD)ELISA試劑盒 ,英文名: DLD ELISA Kit
人胃泌素釋放多肽(GRP)ELISA檢測試劑盒Humangastrin-reliasingpeptide,GRPELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素F2α(PGF2α)免疫試劑盒 Rat Prostaglandin F2α,PGF2α ELISA Kit
英文名稱RattartRate-resistantacidphosphataseorm5bELISAKit大鼠抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP5b)規(guī)格:96T/48T
簡單細(xì)菌結(jié)晶紫染色試劑盒50次
ELISAKitVDR人維生素D受體規(guī)格:48T/96T
豚鼠γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒
HumanLactoferrinantibodyIgG,LF/LTFAb-IgGELISAkit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCystatinC,Cys-CELISA試劑盒人半*蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織HHV6(HUMANHERPESVIRUS6)病毒定量PCR擴(kuò)增檢測試劑盒20次
HumanpodocinELISAKit人PodocinELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
神經(jīng)氨酸酶(唾液酸酶)檢測試劑盒-比色法100T使用說明書人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP-10)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)γ羧基谷酸蛋白(MGP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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