當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法
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更新時間:2017-07-07 11:58:42瀏覽次數(shù):182次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
Caki-2(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞裂解物HLECL
NTRK1 Others Rat 大鼠 TrkA / NTRK1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
A2780/Taxol細(xì)胞,人卵巢癌*耐藥株 鼠腹水單核細(xì)胞瘤,J774A.1細(xì)胞 前列腺癌組織源性原代細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)/1ml
CL-0116HSC-T6(大鼠肝星形細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HBdSMC Pellet 人膀胱平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人腦膜細(xì)胞cDNAHMC cDNA
二氫*還原酶缺陷型中國倉鼠卵巢細(xì)胞;CHO/dhFr-
GALNT2 Others Human 人 GALNT2 / GalNAc-T2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0053Calu-1(人肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
ZR-75-30細(xì)胞,人癌細(xì)胞系 人T淋巴細(xì)胞(白血病CD8+),Molt-4細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5
BRL-3A(大鼠正常肝細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CPE Others Human 人 CPE 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人內(nèi)根殼細(xì)胞裂解物HHIRSCL
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
MC3T3-E1細(xì)胞,小鼠成骨細(xì)胞系 V79(中國倉鼠肺細(xì)胞) 家兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞;2012083MSC
EFNB2 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
COLO 201(人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
小鼠磷酸二酯酶12(PDE12)ELISA試劑盒 ,英文名: PDE12 ELISA Kit
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA檢測試劑盒Humanaconitase2,ACO-2ELISAKit 96T/48T
大鼠牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)免疫試劑盒 Rat Dentin Matrix Protein 1,DMP1 ELISA Kit
英文名稱RatHLA-1ELISAKit大鼠組織相容性抗原(HLA-1)規(guī)格:96T/48T
鈣離子膜通道二氫吡啶受體(DHPR)功能熒光檢測試劑盒20次
ELISAKitLp-PL-A2人脂蛋白磷脂酶A2規(guī)格:48T/96T
豚鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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葡萄糖氧化酶檢測試劑盒-熒光法100T實驗方法人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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