當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 葡萄糖檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書
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更新時間:2017-07-07 11:57:43瀏覽次數(shù):163次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)葡萄糖檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測或流式細(xì)胞儀分析。
葡萄糖檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
BT-20(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
人氣管上皮細(xì)胞裂解物HTEpiCL
TNFRSF14 Others Cynomolgus 食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Sw626細(xì)胞,人卵巢癌細(xì)胞 鮭魚胚胎細(xì)胞,RTG細(xì)胞 破骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0132KG-1(人急性骨髓性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
HBSMC Pellet 人支氣管平滑肌細(xì)胞團(tuán)塊 > 1 mio.cells 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪裂解物HMSC-ad L
ACHN, 人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞
GBA3 Others Human 人 GBA3 / CBGL1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達(dá)株;293sars181A
SW579細(xì)胞,人甲狀腺癌細(xì)胞 人鼻咽癌細(xì)胞系,HNE2-LMP1細(xì)胞 CL-0363Hs68(人男性正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA
LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CSF1R Others Mouse 小鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人慢性髓系白血病細(xì)胞;K562
C57BL/6小鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞 C57BL/6 mouse adipose mesenchymal stem cells
BE(2)C細(xì)胞,人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 乙型溶血性鏈球菌 人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1
Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HEp-2(人喉表皮樣癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0450SW 982(人滑膜肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 人上皮細(xì)胞;MCF-10A
大鼠心肌肌鈣蛋白Is(cTnI)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人無花果酶2(FCN2)免疫試劑盒 Human FCN2 ELISA Kit
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅴ活性測試盒 可見分光光度法 25管12樣
Ratphospho-inhibitorysubunitofNF-κBα,pIKBαELISA試劑盒大鼠磷酸化核因子κB抑制蛋白α(pIKBα)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGHELISA試劑盒人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanmaturationpromotingfactor,MPFELISAKit人成熟促進(jìn)因子(MPF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶(LPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat vasoactive intestinal peptide (VIP) ELISA Kit 大鼠血管活性腸肽(VIP)ELISA試劑盒
HumanAnnexinⅤ,ANX-ⅤELISAKit 人膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclicAMPresponseelementbindingprotein,CREBELISA試劑盒人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織FGFR1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
HumanProAtrialNatriureticPeptide,Pro-ANPELISAKit人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡萄糖檢測試劑盒-熒光法100T使用說明書人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-AbIgG)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人結(jié)締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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