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更新時間:2017-07-07 11:55:48瀏覽次數(shù):109次
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葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
AML-193(人急性單核細胞白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2
人臍靜脈平滑肌細胞裂解物HUVSMCL
TSPAN1 Others Human 人 TSPAN1 (aa 110-211) 人細胞裂解液 (陽性對照)
MB-271細胞,人癌細胞 中國倉鼠腎細胞(二氫*還原酶缺陷型),CHO/dhFr-細胞 角膜上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
CL-0188QGY-7701(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2
NHEM.f Pellet 正常人表皮黑素細胞團塊(少年者) > 1 mio.cells 人腸平滑肌細胞裂解物HISMCL
人真皮淋巴內(nèi)皮細胞裂解物HDLECL
GFRA1 Others Rat 大鼠 GFRA1 / GFR alpha-1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細胞;MuM-2C
9204細胞,人肝癌細胞 大鼠嗜堿性細胞白血病細胞,RBL-2H3細胞 山羊腎上皮樣細胞;DG-K1
MDA-MB-231(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-22120 Endothelial Cell GrowthMedium MV KIT, 內(nèi)皮細胞生長培養(yǎng)基MV套裝 500ml
CDK7 & CCNH & MNAT1 Others Human 人 CDK7 & CCNH & MNAT1 Heterotrimer 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細胞cDNAHCPEC cDNA
615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7912
Eca-109細胞,食管癌細胞 人食管鱗癌,KYSE 150細胞 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS5A
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-C4
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/California/07/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠心磷脂抗體IgA(ACA IgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人戊型肝炎病毒抗體(IgG)免疫試劑盒 Human Hepatitis E virus antibody IgG ELISA Kit
線粒體呼吸鏈復合體Ⅲ活性測試盒 可見分光光度法 25管/24樣
Ratperoxisomeproliferatorsactivatorreceptorsalpha,PPAR-αELISA試劑盒大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanimmunoglobulinheavychain,IgHELISA試劑盒*重鏈(IgH)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanMatrixmetalloproteinase7,MMP-7ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP-7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human cytotoxin associated protein A (CagA) ELISA Kit 人細胞毒素相關(guān)蛋白A(CagA)ELISA試劑盒
Humananti-cardiolipinantibodyIgM,ACA-IgMELISAKit 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancutaneouslymphocyte-associatedantigen,CLAELISA試劑盒人皮膚淋巴細胞相關(guān)抗原(CLA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織EPHB3激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
humanprogestinandadipoQreceptorfamilymemberⅦ,PAQR7ELISAKit人孕同和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
葡萄糖-6-磷酸脫氫酶(G-6-PD)檢測試劑盒100T免費代測人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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人抗BP230抗體(BP230-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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