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procaspase-3激活劑200ul實驗方法

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更新時間:2017-07-06 08:52:57瀏覽次數:693次

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公司供應的procaspase-3激活劑200ul實驗方法品種類齊全,檢測效果好,質量保證,歡迎廣大科研用戶!

procaspase-3激活劑200ul實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
procaspase-3激活劑200ul實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
procaspase-3激活劑200ul實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細胞;
3)細胞洗滌:用預冷1×PBS4)重懸細胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細胞;
5Annexin V-FITC標記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer
Calu-1(人肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2

CM-M037小鼠小腸隱窩上皮細胞*培養(yǎng)基100mL

KLRC1 Others Mouse 小鼠 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 人細胞裂解液 (陽性對照)

TE-10細胞,人食管癌細胞 人腦膠質母細胞瘤細胞,TG-905細胞 家貓皮膚細胞;FCA-S1

小鼠肉瘤瘤株;S180

PTPRC Others Human CD45 人細胞裂解液 (陽性對照)
*HBSS

IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照)

人角膜內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

B95-8細胞,產EBV的絨猴白細胞 A549(人肺腺癌細胞) 非洲綠猴腎細胞;BS-C-1

EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標簽)

HEL(人紅白細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 肝實質細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

前脂肪細胞分化培養(yǎng)基PADM-prf

EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYF

大鼠肝細胞瘤;H-4-II-E 紅白細胞白血病細胞,HEL299細胞 PT67細胞,鼠逆轉錄酶病毒包裝細胞

JEC, 人子宮內膜腺癌細胞系 Human

LRP1 Others Human LRP1 / A2MR / CD91 (aa 786-1165) 人細胞裂解液 (陽性對照)
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血清/糖皮質激素調節(jié)激酶2(SGK2)免疫試劑盒 human serum/glucocorticoid regulated kinase 2,SGK2 ISA KIT

人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒 ,英文名: APF ELISA Kit

RatInterferonβ,IFN-β/IFNBELISA試劑盒大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanGastrointestinalcancerMarker-CA199ELISA試劑盒人胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

HumanInterleukin13,IL-13ELISAKit人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠*巰基轉移酶(GST)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human retinol binding protein (RBP) ELISA Kit 人*結合蛋白(RBP)ELISA試劑盒

HumansecretoryimmunoglobulinA,SIgAELISAKit 人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAnti-smoothmuscleantibody,ASMAELISA試劑盒人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T

植物細胞周期S早期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10

HumantrypsinELISAKit人*(trypsin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
procaspase-3激活劑200ul實驗方法小鼠BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠apelin12(AP12)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

小鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

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