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Caspase 4抑制劑200ul實驗方法

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更新時間:2017-07-06 08:51:25瀏覽次數(shù):334次

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Caspase 4抑制劑200ul實驗方法CA46(Burkitts淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CM-M069小鼠腎成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

CD81 Others Human CD81 / TAPA-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Eca-109細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞,SF126細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17

小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B5

CD84 Others Human CD84 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

Caspase 4抑制劑200ul實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 4抑制劑200ul實驗方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 4抑制劑200ul實驗方法實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機前,補加200μL1×Binding Buffer。
CL-0278HCCLM3(人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

IL17RB Others Mouse 小鼠 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人晶狀體上皮細(xì)胞cDNAHLEpiC cDNA

LCC1細(xì)胞,人癌細(xì)胞 VERO衍生株,SVP細(xì)胞 成骨細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)

TG-905(人腦膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HPMEC Pellet 人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞團塊 > 1 mio.cells 多聚賴氨酸 1 mg/mlPLL
PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基PEpiCM-prf

大鼠支氣管成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

EBTr (NBL-4)細(xì)胞,牛胚氣管細(xì)胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質(zhì)瘤細(xì)胞) CM-H018人成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白

MKN-28(人胃癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠組織多肽抗原(TPA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試劑盒 Human SAA ELISA Kit

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HumanInterleukin12,IL-12/P40ELISAKit人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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