當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細胞生物學(xué)試劑>>細胞凋亡檢測>> Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法
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更新時間:2017-07-06 08:47:24瀏覽次數(shù):352次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法BNL CL.2(小鼠胚胎肝細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0045C-33 A(人子細胞)5×106cells/瓶×2
COL5A2 Others Human 人 COL5A2 人細胞裂解液 (陽性對照)
Ski細胞,人宮頸上皮細胞癌 人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞,CCRF-CEM細胞 大鼠小腸隱窩上皮細胞;IEC-6
中國倉鼠肺細胞;V79
CPB1 Others Human 人 CPB1 / PCPB 人細胞裂解液 (陽性對照)
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導(dǎo)細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
角膜上皮細胞培養(yǎng)基CEpiCM
IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人皮膚成纖維細胞;HSAS4
SUNE-1亞株-5-8F細胞,鼻咽癌細胞系 小鼠黑色素瘤高轉(zhuǎn)移細胞,B16F10細胞 CM-H039人小腸粘膜上皮細胞*培養(yǎng)基100mL
NRK(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-26501 Follicle Dermal Papilla CellGrowth Medium, 真皮細胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml
NA Others H9N2 甲型流感 H9N2 (A/Hong Kong/1073/99) 神經(jīng)氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細胞;U14-GFP
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA 腹水瘤細胞,SAC-IIB2細胞 VMR106細胞,大鼠骨肉瘤細胞
人胚肺二倍體細胞;2BS
CLEC4A Others Human 人 DCIR / CLEC4A / CLECSF6 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠V-Ets骨髓成紅細胞增多癥病毒E26癌基因同源物1(ETS1)ELISA試劑盒 ,英文名: ETS1 ELISA Kit
人血栓素A2(TX-A2)ELISA檢測試劑盒HumanThromboxaneA2,TX-A2ELISAKit 96T/48T
大鼠肌酸激酶同工酶BB(CK-BB)免疫試劑盒 Rat creatine kinase BB isoenzyme,CK-BB ELISA kit
英文名稱RatCCL1ELISAKit大鼠CCL1規(guī)格:96T/48T
藍藻5-羥色胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetyltransferase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
ELISAKitF1+2人*原片段F1+2規(guī)格:48T/96T
小鼠胱硫醚-r-裂解酶(CSE)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glycosylation of human glomerular tissue glycation end products (GTE-AGE) ELISA Kit 人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物(GTE-AGE)ELISA試劑盒
HumanLeukotrieneC4,LT-C4ELISAKit 人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAnti-proteinase3antibodyIgG,PR3Ab-IgGELISA試劑盒人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞色素C釋放凋亡檢測試劑盒10次
Humantumorspecificantigen,TSAELISAKit人特異性抗原(TSA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Annexin V Alexa Fluor647 / PI 細胞凋亡檢測試劑盒50T實驗方法小鼠白介素15(IL-15)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素13(IL-13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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