Annexin V-APC / 7-AAD 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T使用說明書使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Annexin V-APC / 7-AAD 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T使用說明書操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Annexin V-APC / 7-AAD 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒50T使用說明書實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CL-0061CHO(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

KCT2 Others Human 人 KCT2 / C5orf15 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

A431細(xì)胞，表皮癌細(xì)胞系 人T淋巴細(xì)胞系,H9細(xì)胞 tTA基因修飾的小鼠畸胎瘤細(xì)胞(B類);P19-CAG-tTA-1D3

中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS4B

CST5 Others Human 人 CST5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823

IL1R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

CM-H130人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

MKN-28細(xì)胞，人胃癌細(xì)胞 人骨肉瘤細(xì)胞,U-2 OS細(xì)胞 幼蚊細(xì)胞;C6/36

DLD-1(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CA9 Others Human 人 CA9 / CAIX 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
FCGR2 Others Mouse 小鼠 CD32 / FCGR2B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

破骨細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

PK(15) 豬腎細(xì)胞

犬腎細(xì)胞系/野生型;MDCK/wild

GBC-SD, 人膽囊癌細(xì)胞

人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82 [GLC82] 大鼠食管上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
鵝白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

人血栓素A2合成酶(TX-A2)免疫試劑盒 Human Thromboxane-A2 Synthase(TX-A2 Synthase)ELISA Kit

人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： TPO-Ab ELISA Kit

RatInsulin-likegrowthfactorbindingprotein2,IGFBP-2ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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