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更新時間:2017-07-06 08:45:37瀏覽次數:346次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網CCCP (50 mM) 細胞凋亡誘導劑100ul售后服務使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數量不以應低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
CCCP (50 mM) 細胞凋亡誘導劑100ul售后服務操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內,進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當的凋亡誘導劑誘導細胞凋亡,并設立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
CCCP (50 mM) 細胞凋亡誘導劑100ul售后服務實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
Bcap-37(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0101Hela(人細胞)5×106cells/瓶×2
SELE Others Mouse 小鼠 E-Selectin / CD62e / SELE 人細胞裂解液 (陽性對照)
WI-38細胞,*系 人EBV陽性B淋巴瘤細胞,P3HR1細胞 615小鼠樹突狀細胞肉瘤瘤株;DCS
家貓肺細胞;FCA-L1
CTSL1 Others Human 人 CTSL1 / Cathepsin-L1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人支氣管上皮細胞cDNAHBEpiC cDNA
IL1R1 Others Rat 大鼠 IL1R1 / CD121a 人細胞裂解液 (陽性對照)
3T3A31 小鼠胚胎成纖維細胞
CL-0238U-87 MG(人神經膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2
MN-h, 小鼠海馬神經元
表達SV40T和EBNA1的人胚腎細胞;293ET 人腎上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
HDAC3 Others Human 人 HDAC3 / Histone deacetylase 3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM-sf-prf
轉化細胞
P3X63Ag8細胞,骨髓瘤細胞 人十二指腸腺癌細胞,HuTu-80細胞 CM-H029人臍帶單核細胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠胚胎心肌細胞;H9c2(2-1)
FCGR4 Others Mouse 小鼠 CD16-2 / FCGR4 人細胞裂解液 (陽性對照)
鵝雌激素(E)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血吸蟲抗體(IgG)免疫試劑盒 Human schistosoma haematobium antibody IgG ELISA kit
人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA試劑盒 ,英文名: CLA ELISA Kit
RatInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISA試劑盒大鼠胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanFructose-1,6-bisphosphatealdolase,FDAELISA試劑盒人果糖1,6二磷酸醛縮酶(FDA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterferonβ,IFN-β/IFNBELISAKit人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat immunoglobulin A (IgA) ELISA Kit 大鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
humanProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit 人前列腺素E1(PGE1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humananti-parotidductantibodyELISA試劑盒人抗腮腺管抗體(anti-parotidductAb)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細胞壁束縛酸性蔗糖轉化酶(acidinvertase)活性比色法定量檢測試劑盒(胞壁)20次
Humantyrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains1,Tie1ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶1(Tie1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
CCCP (50 mM) 細胞凋亡誘導劑100ul售后服務小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠半胱酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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