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更新時間:2017-07-06 08:45:13瀏覽次數(shù):140次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Caspase 6 活性檢測試劑盒20T免費代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細胞,流式細胞儀檢測時,細胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 6 活性檢測試劑盒20T免費代測操作方法
1.懸浮細胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細胞用*消化收集用PBS洗滌細胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細胞;
4.請在1 hour內(nèi),進行下述熒光顯微鏡或流式細胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細胞;
2.對于貼壁細胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細胞并誘導細胞凋亡;
(1)將細胞于蓋玻片上生長,用適當?shù)牡蛲稣T導劑誘導細胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細胞儀分析
用流式細胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 6 活性檢測試劑盒20T免費代測實驗步驟
貼壁細胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細胞收集。懸浮細胞收集:離心5分鐘;貼壁細胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細胞;
(3)細胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細胞;
(5)Annexin V-FITC標記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標記:上機前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機前,補加200μL的1×Binding Buffer。
AtT-20(小鼠垂體瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0117HT-1080(人纖維肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
OPCML Others Mouse 小鼠 OBCAM / OPCML 人細胞裂解液 (陽性對照)
CoC1/DDP細胞,CoC1細胞耐藥亞株 分泌A2抗體B淋巴細胞,BB7.2細胞 615小鼠T細胞性白血病瘤株;L7712
犬腎細胞;MDCK(NBL-2)
CTSZ Others Mouse 小鼠 CTSX 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-NS2
IL1R2 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 人細胞裂解液 (陽性對照)
滑膜細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
T2細胞,轉(zhuǎn)HLA-2基因B細胞 小鼠癌細胞,MA891細胞 人神經(jīng)元cDNAHN cDNA
NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2
CNE(人鼻咽癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0134KU812(人外周血嗜堿性白血病細胞)5×106cells/瓶×2 雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7
AMBP Others Human 人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 人細胞裂解液 (陽性對照)
平滑肌細胞培養(yǎng)基SMCM
人肝細胞;QSG-7701 [QSG7701]
大鼠腎系膜細胞;RMC 骨肉瘤細胞,U-2 OS細胞 Walker-256細胞,大鼠肝癌細胞(癌細胞接種到肝臟成瘤)
HCT116, 人結(jié)直腸癌細胞 Human
MSTN Others Mouse 小鼠 MSTN / GDF8 人細胞裂解液 (陽性對照)
鵝促卵泡素(FSH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血吸蟲抗原免疫試劑盒 Human schistosoma ELISA Kit
人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒 ,英文名: AFA ELISA Kit
RatInsulinReceptorβ,ISR-βELISA試劑盒大鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanFreeTri-iodothyronineIndes,Free-T3ELISA試劑盒人游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanInterferonα,IFN-αELISAKit人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠核因子kb(NF-kb)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒
humanAnti-ThyroidMicrosomeAntibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
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植物維生素E高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次
Humantyrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人*激酶2(Tyk-2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
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