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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測(cè)>> Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-06 08:43:06瀏覽次數(shù):146次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
我司Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T售后服務(wù)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式!我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢!
Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對(duì)于細(xì)胞懸液每50~100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬(wàn)細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T售后服務(wù)注意事項(xiàng)
(1)本試劑只適用于實(shí)驗(yàn),不適用于臨床檢測(cè);
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對(duì)眼睛有刺激作用,使用時(shí)需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí),盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個(gè)操作過程動(dòng)作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請(qǐng)盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
(7)PI染色時(shí)間過長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
AGS(人胃腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0165NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
SPN Others Rat 大鼠 SPN / CD43 / Sialophorin 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
L129細(xì)胞,NCTC克隆929細(xì)胞 人Burkitt`s淋巴瘤細(xì)胞,Raji細(xì)胞 小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞;BV2
小香豬皮膚細(xì)胞;SSC-S2
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
羊源細(xì)胞
IL1RAPL1 Others Mouse 小鼠 IL-1R8 / IL1RAPL1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
*(含10mL酶解緩沖液) 1mL
BEL-7404人肝癌細(xì)胞 BEL-7404 human hepatocarcinoma cells 1640+10% FBS
IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白
人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(HPAEC) ( 5×105 ) rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 Rattus
MSR1 Others Rat 大鼠 MSR1 / SCARA1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
牛陀螺狀細(xì)胞;BT
腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
3T6swiss細(xì)胞,小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人癌細(xì)胞,M453細(xì)胞 *過氧化物酶分析試劑盒GPX
SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1
IL13RA2 Others Human 人 IL13RA2 / IL13R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠腭/肺/鼻上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白(PLUNC)ELISA試劑盒 ,英文名: PLUNC ELISA Kit
人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanfibrinopeptideA,FPAELISAKit 96T/48T
大鼠前列腺素E2合成酶(PGES)免疫試劑盒 Rat prostaglandin E2 synthase,PGES ELISA Kit
英文名稱RatSPE(IgG,M)ELISAKit大鼠抗抗體(SPE)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
膠原蛋白酶消化試劑盒20毫升
ELISAKitVD2人維生素D2規(guī)格:48T/96T
小鼠黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat thioredoxin reductase (TrxR) ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶(TrxR)ELISA試劑盒
humanglutamicaciddecarboxylaseautoantibody,GAD-AbELISAKit 人*脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-neutrophilgranulesantibody,ANGAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物乳酸脫氫酶(LDH)總活性酶動(dòng)力比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
HumanUltraSensitiveProstateSpecificAntigen,PSAUSELISAKit人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase 9 活性檢測(cè)試劑盒-熒光50T售后服務(wù)小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠單胺氧化酶A(MAOA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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