當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測>> Caspase 8 活性檢測試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測
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更新時間:2017-07-06 08:42:38瀏覽次數(shù):146次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Caspase 8 活性檢測試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細(xì)胞懸液每50~100 萬細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設(shè)置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進(jìn)行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細(xì)胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光;而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對于特定的細(xì)胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對于懸浮細(xì)胞:
(1)取 10~60 萬細(xì)胞,重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中,細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細(xì)胞。棄上清,注意盡量不要吸除細(xì)胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細(xì)胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細(xì)胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細(xì)胞儀分析。
Caspase 8 活性檢測試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標(biāo)記時,盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細(xì)胞,盡量在4℃下操作,以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
(5)在細(xì)胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進(jìn)行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
Acc-2(人涎腺腺樣囊性癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0181P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
EPHB1 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB1 / EPHT2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
HR-8348細(xì)胞,直腸腺癌 人淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞,JK(Jurkat)細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌;NCI-H2227
大額牛皮膚細(xì)胞;BFR-S3
ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人臍動脈平滑肌細(xì)胞裂解物HUASMCL
IL1RL1 Others Mouse 小鼠 IL1RL1 / ST2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
615小鼠滑膜肉瘤瘤株;ZM755
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-C4 III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細(xì)胞 Human
CA9 Others Mouse 小鼠 CAR9 / CAIX / CA9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
VSTM1 Others Human 人 VSTM1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
牛腎細(xì)胞;MDBK(NBL-1)
彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL
SGC-7901人胃腺癌細(xì)胞 SGC-7901 human gastric cancer cells 1640+10% FBS
IL3 Protein Human 重組人 IL-3 / Interleukin-3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人食道平滑肌細(xì)胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠紋狀體神經(jīng)元 Rattus
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MCP2 ELISA Kit
人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB)ELISA檢測試劑盒HumanfibrinopeptideB,FPBELISAKit 96T/48T
大鼠膜聯(lián)蛋白I(ANX-I)免疫試劑盒 Rat annexin I,ANX-I ELISA Kit
英文名稱RatreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligandELISAKit大鼠核因子活化因子受體配體(RANKL)規(guī)格:96T/48T
酵母菌*補(bǔ)充混合(CSM)培養(yǎng)基100毫升
ELISAKitFK506人*規(guī)格:48T/96T
小鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rat phosphatidylinositol antibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgMELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgMELISA試劑盒
humanthyroid-stimulatinghormonereceptorantibody,TSHRELISAKit 人促甲狀腺激素受體抗體(TSHR)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-neutrophilantibody,ANAELISA試劑盒人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)*試劑盒(包括抗體)10次
humanUltrasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit人高敏甲狀腺素(u-T4)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Caspase 8 活性檢測試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測小鼠蛋白激酶A(PKA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠膽囊收縮素8(CCK-8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠膽囊收縮素/腸促*肽(CCK)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
我司Caspase 8 活性檢測試劑盒-熒光50T免費(fèi)代測本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨,為客戶提供輕松便捷,安全可靠的網(wǎng)上采購模式!我們將竭誠為您服務(wù),咨詢!
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