當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測>> Dexamethasone 4ml售后服務(wù)
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更新時間:2017-07-05 12:29:16瀏覽次數(shù):129次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)Dexamethasone 4ml售后服務(wù)使用注意事項
1.微量試劑取用前請離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Dexamethasone 4ml售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Dexamethasone 4ml售后服務(wù)實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
A-375(人惡性黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CL-0229T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
SH-77細(xì)胞,小細(xì)胞肺癌 人T細(xì)胞白血病細(xì)胞,T-CEM細(xì)胞 人T淋巴瘤轉(zhuǎn)基因細(xì)胞;Jurkat D,E
羅猴胎腎細(xì)胞;MA104
BACE1 Others Human 人 BACE1 / ASP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
人尿道上皮細(xì)胞cDNAHUC cDNA
IL21R Others Cynomolgus 食蟹猴 IL-21R / Interleukin-21 Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A4 *(含10mL 酶解緩沖液) 1mL
C2C12, 小鼠肌原細(xì)胞 Mouse
TNFRSF10A Others Human 人 TNFRSF10A / CD261 / APO2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EPHB2 Others Mouse 小鼠 EphB2 / Hek5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
牛腦垂體提取物BPE
人腦瘤細(xì)胞;SF17
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2C7 急性淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞,MOLT-4細(xì)胞 H9c2(2-1)細(xì)胞,大鼠心肌細(xì)胞
C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞 Rattus
CD97 Others Human 人 CD97 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
鵝固醇合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血小板激活因子乙酰水解酶2,細(xì)胞質(zhì)(PAFAH2)免疫試劑盒 Human Plaet-activating factor acetylhydrolase 2, cytoplasmic(PAFAH2)ELISA kit
人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)ELISA試劑盒 ,英文名: SLA ELISA Kit
RatImmunoglobulinM,IgMELISA試劑盒大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISA試劑盒人游離原卟啉(FEP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humanintegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISAKit人整合素連接激酶1(ILK-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠*(cAMP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human neurotrophin 3 (NT-3) ELISA Kit 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒
humanadrencocorticotropichormone,ACTHELISAKit 人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humananti-mutatedcitrullinatedvimentinantibody,MCVELISA試劑盒人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體(MCV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物氫/鉀ATP酶(H+/K+-ATPase)活性比色法定量檢測試劑盒20次
Humanurinarybladdercancerantigen,UBCELISAKit人膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Dexamethasone 4ml售后服務(wù)小鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠肺炎病毒(PVM)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
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