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更新時間:2017-07-03 14:58:59瀏覽次數(shù):458次
聯(lián)系我時,請告知來自 儀表網(wǎng)DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結(jié)果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務儲存條件: -20℃避光保存。
有效期: 六個月。
產(chǎn)品簡介:
活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,參與細胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多和病理過程。
DHE活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針DHE(Dihydroethidium)進行活性氧檢測的試劑盒。DHE可自由透過活細胞膜進入細胞內(nèi),并被細胞內(nèi)的ROS氧化,形成氧化乙啶;氧化乙啶可摻入染色體DNA中,產(chǎn)生紅色熒光。根據(jù)活細胞中紅色熒光的產(chǎn)生,可以判斷細胞ROS含量的多少和變化。二氫乙啶在細胞內(nèi)主要被超氧陰離子型ROS氧化,用流式細胞儀或熒光顯微鏡可直接觀察,是一種快速簡便的組織或培養(yǎng)活細胞中ROS經(jīng)典檢測方法。 在激發(fā)波長535nm,發(fā)射波長610 nm附近,使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計、熒光酶標儀、流式細胞儀等檢測熒光,從而測定細胞內(nèi)活性氧水平。
DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結(jié)束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
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含量測定丁本酞101035-200901常溫,避光500mg
*;桔皮甙;陳皮甙;柑果甙;二氫黃酮甙;*;二氫黃酮苷 Hesperidin 520-26-3 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
細胞凋亡測試盒(TdT酶、稀釋液、POD)50支/包RT
9016-87-9聚(本基)-聯(lián)-甲醛Polymetxylene polypxenyl polyisocyanate
2-(pyridin-2-yl)pxenol 33421-36-2
(1R,2R)-二[(2-甲氧... (R,R)-DIPAMP,≥95% 55739-58-7 50MG 表面活性劑
4-基酚shēng huà shì jì容量:500毫克
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(配套靛基質(zhì))shēng huà shì jì容量:25克
611-19-8鄰錄錄芐2-Chloropenzyl xloni7e
鄰啰啉shēng huà shì jì容量:保存:-20℃150ku
間苯甲酰 3-Chlorobenzoyl chloride,≥97.0% 618-46-2 25G 通用試劑
補骨脂素 Psoralen (≥98%,HPLC) 66-97-7 20MG 標準品
DHE-ROS活性氧檢測試劑盒200T售后服務γ-人球蛋白/人丙種球蛋白/普通丙種球蛋白/human γ-globulin BR,96- 250毫克 國產(chǎn)/進口
Chitinase殼多糖酶25克BR,5u/ul,99%
鉑;柏金;鉑黑 PlctinuM 7440-6-4
一水肌酸/肌酸/N-甲基胍基乙酸/胍基醋酸/肌肉素/肌基酸/甲胍基醋酸/Creatine Monohydrate BR,99%, 100克 國產(chǎn)/進口
二胺氧化酶測試盒/DAO測試盒 比色法 25毫升 國產(chǎn)
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