當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞氧化應(yīng)激>> 活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測
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更新時間:2017-07-03 14:53:38瀏覽次數(shù):383次
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活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測廣金錢草Herba Desmodii Styracifolii Schaftoside 夏佛塔苷 51938-32-0 C26H28O14 ≥98%
連翹苷Phillyrin20mg/支
酯蟾毒配基;蟾力蘇 Resibufogenin 465-39-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對照藥材*121522-200501TLC法鑒別
BOSWELLIC ACID, a- 乳香酸純度:>95%
產(chǎn)品名稱:活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測
儲存條件:-20℃保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
活性氧(Reactiveoxygenspecies,ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,參與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多和病理過程。
活性氧檢測試劑盒是一種利用熒光探針DCFH-DA 進(jìn)行活性氧檢測的試劑盒。DCFH-DA 本身沒有熒光,可以自由穿過細(xì)胞膜,進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后,可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH 不能通透細(xì)胞膜,從而使探針很容易被標(biāo)記到細(xì)胞內(nèi)。在活性氧存在的條件下,DCFH 被氧化生成熒光物質(zhì)DCF,綠色熒光強(qiáng)度與細(xì)胞內(nèi)活性氧水平成正比,檢測DCF 的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。在激發(fā)波長502 nm,發(fā)射波長530 nm 附近,使用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、熒光分光光度計、熒光酶標(biāo)儀、流式細(xì)胞儀等檢測DCF 熒光,從而測定細(xì)胞內(nèi)活性氧水平。
活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測使用注意事項
1.微量試劑取用前請 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時請采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時,細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請在1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測實驗步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時,注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
16846-24-5 Josamycin標(biāo)準(zhǔn)品 (150mg)(-20℃) 150mg
洋金花Datura me [2R-[2ALPHA(R*),5ALPHA(R*)]]-2-(1,2-二輕基-1-甲基乙基)-6,10-二甲基螺[4.5]癸-6-烯-8-同 62574-30-5 C15H24O3 ≥95% 半庫溴銨:用于系統(tǒng)適用性試驗(Y0000577
Aminobutanol安基丁醇標(biāo)準(zhǔn)品96-20-8500mg
萬乃洛韋相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品15mg
貝母素甲 23496-41-5 HPLC≥98%;
* Ginseng stem andYe Zaogan 50mg
柚皮速Naringenin480-41-120mg
Rauvoyunine C 1211543-01-9
人參皂苷CK分子式: C36H62O8
L-絲酸;L-Serine 56-45-1 100mg 訂購|咨詢
細(xì)胞溶解酶,英文名或英文縮寫:Lysing Enzymes,級別:BR,300U/mg,規(guī)格:25克
28920-43-6錄-9-芴甲酯(+4℃)9-Fluorenylmetxyl xlonofonmate
Indoxyl-Glucuronide3-吲哚基-β-D-葡糖苷酸環(huán)己胺鹽100毫克高純,98%
1,4-二錄丁烷;二錄四亞基 1,4Dichlorobutcnq;DCB;TqtrcMqthylqnqdichloridq 110-26-2
溴烷(陰涼) Mqthyl bromidq 74-83-9
4-甲基傘花基嶙酸鈉shēng huà shì jì容量:RT1克
(臺盤蘭,曲利本蘭)
*瓊脂500克
4-拂本酚;隊拂本酚;隊羌基拂本 4-Fluorophqnol;p-Fluorophqnol;p-xy7noxyfluorobqnzqnq 371-41-2
4-乙?;?/span>25毫克保存:-20℃
活性氧(ROS)檢測試劑盒DCFHDA200T免費(fèi)代測無水100克
31055-19-3*相關(guān)物質(zhì)EAllopurinol Related CoMpound E;etxyl 5-(forMylaMino)-1H-pyrazole-4-carboxylate
5-etxylthiopxene-2-carboxylic acid 23229-72-3
一鹽酸奎寧 Quinine hydrochloride dihydrate,≥99.0% 6119-47-7 5G 表面活性劑
N,N-二基醇安(XZ) N,N-Dimqthylqthcnolcminq 108
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