丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
產(chǎn)品名稱：丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。

有效期：一年。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

機(jī)體通過酶系統(tǒng)與非酶系統(tǒng)產(chǎn)生氧自由基，后者能攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸（polyunsaturatedfattyacid,PUFA），引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并因此形成脂質(zhì)過氧化物。如：醛基（丙二醛MDA）、酮基、羥基、羰基、氫過氧基或內(nèi)過氧基，以及新的氧自由基等。脂質(zhì)過氧化作用不僅把活性氧轉(zhuǎn)化成活性化學(xué)劑，即非自由基性的脂類分解產(chǎn)物，而且通過鏈?zhǔn)交蜴準(zhǔn)街ф湻磻?yīng)，放大活性氧的作用。因此，初始的一個(gè)活性氧能導(dǎo)致很多脂類分解產(chǎn)物的形成，這些分解產(chǎn)物中，一些是無(wú)害的，另一些則能引起細(xì)胞代謝及功能障礙，甚至死亡。氧自由基不但通過生物膜中多不飽和脂肪酸（PUFA）的過氧化引起細(xì)胞損傷，而且還能通過脂氫過氧化物的分解產(chǎn)物引起細(xì)胞損傷。因而測(cè)試MDA的量常?？煞从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過氧化的程度，間接地反映出細(xì)胞損傷的程度。MDA的測(cè)定常常與SOD的測(cè)定相互配合，SOD活力的高低間接反應(yīng)了機(jī)體清除氧自由基的能力，而MDA的高低又間接反應(yīng)了機(jī)體細(xì)胞受自由基攻擊的嚴(yán)重程度。

丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
垂盆草Sedum sarmentosum Sarmentosin 垂盆鈔草甙(治肝炎藥)，垂盆草甙 71933-54-5 C11H17NO7 ≥95%

升麻速Cimifugin20mg/支

柴胡皂苷C;柴胡皂甙C Saikosaponin C 20736-08-7 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

含量測(cè)定*100686-200401常溫，避光100mg

*相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品15883-20-250mg
165450-17-9 紐甜標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

靛藍(lán)Indigo48-89-320mg

Secoisolariciresinol 開環(huán)異落葉松樹脂酚 29388-59-8

Benoxinate xy7nochloride*標(biāo)準(zhǔn)品5987-82-6200mg*標(biāo)準(zhǔn)品

* E ;cucurbitacin 18444-66-1 10mg 訂購(gòu)|咨詢
結(jié)香花Edgeworthia chrysantha Lindl Tiliroside 銀鍛苷 20316-62-5 C30H26O13 ≥98%

右旋龍腦D-bornqol207-70-020mg

毛地黃素 Digitaline 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定

對(duì)照品*S130539-200301系統(tǒng)適應(yīng)性

2,3,5,4-四羥基二本葡萄糖苷;何首烏苷 2,3,5,4-tetraxy7noxyl dipxenyletxylene-2-o-glucoside 82373-94-2 20mg HPLC≥98% 暫無(wú)簡(jiǎn)介
細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量：50張/盒

聚氧丙烯聚氧共聚物Polyetxylene-polypropylene glycol

甲氧基鈉，英文名或英文縮寫：wo7ium metxoxide，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：1克

孟加拉紅培養(yǎng)基 Rose Bengal Medium Null 250G 培養(yǎng)基

二基鋅(約1mol/L的己烷溶液) Diqthylzinc 227-0-0
4-基本以酮shēng huà shì jì容量：500ul*100支

蔗糖 Sucrosq(100Mg) 27-20-1

2,3-Dichloropyridine-4-boronic acid 951677-39-7

* Theophylline (≥98%,HPLC) 58-55-9 50MG 標(biāo)準(zhǔn)品

L-色酸/L-胰化蛋白基酸/L-色基酸/L-2-基-3-吲哚基-1-丙酸/L-基吲哚丙酸/L-Tryptophan BR，99% 10克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
丙二醛（MDA）檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法RNASEINHIBITOR*CLDPAK*RNase抑制劑生物技術(shù)級(jí)10KUCOLD

79-19-6硫代基脲;基硫脲;硫脲ThioseMicarbazide;HydrcarbothioaMide

4-nitnoaniline4-硝基本胺25克BS

一氧化錳 Manganese monoxide 1344-43-0 100G 通用試劑

六溴環(huán)十二烷 1,2,5,6,9,10-Hexabromocyclododecane,95% 3194-55-6 25G 通用試劑