當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測>> Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測
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更新時(shí)間:2017-07-03 14:01:46瀏覽次數(shù):219次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc. Resveratrol 白藜蘆醇 501-36-0 C14H12O3 ≥98%
*皂苷AClinopodiumscponincHPLC≥98%,20mg/支
DL-薄荷醇 DL-Menthol 15356-70-4 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
中藥對(duì)照藥材菝葜(*)121466-200401TLC法鑒別
Nepetin澤蘭黃酮純度:>98%
產(chǎn)品名稱:Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測
儲(chǔ)存條件:裂解緩沖液和檢測液室溫保存;其他-20℃避光保存。
有效期:一年。
產(chǎn)品簡介:
Caspase8活性檢測試劑盒(Caspase8ActivityAssayKit)是采用分光光度法檢測細(xì)胞或組織裂解液中Caspase8酶活性或純化的Caspase8酶活性的試劑盒。Caspase(Cysteine-requiringAspartateProtease)是一個(gè)在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase8被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中比較上游的一個(gè)caspase。在Fas-receptor和TNFR-1介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡過程中caspase8被激活,形成一個(gè)由p18和p10組成的二聚體,進(jìn)一步激活下游的caspase4,caspase6,caspase9和caspase10.本Caspase8活性檢測試劑盒是基于casepase8可以催化底物Ac-IETD-pNA產(chǎn)生黃色的pNA,pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收,從而可以通過測定吸光度來檢測caspase3的活性。本試劑盒用酶標(biāo)儀檢測或容量不超過100μl的分光光度檢測杯檢測,可用于培養(yǎng)細(xì)胞或新鮮組織樣本的caspase-8檢測。
Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測組織樣本。
Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長,用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm,發(fā)射波長647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測,激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長,否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
14255-87-9 帕本達(dá)唑標(biāo)準(zhǔn)品 200mg
*苷IMarsdeniatenacissimaglycosideIHPLC≥98%,20mg/支
Coixol 6-甲氧基-2-本坐啉同 532-91-2
potewwium Bite (AS)碳酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)品298-14-6 1g碳酸氫鉀標(biāo)準(zhǔn)品
L-谷酸;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 56-86-0 0.1g 訂購|咨詢
* Gliquidone 分 子 量:527.6300 編號(hào):33342-05-1 分子式:C27H33N3O6S 別 名:糖腎平;美普他酚鹽酸鹽 基本用途:含量測定。
遠(yuǎn)志Polygala tenuifolia Willd. Polygalaxanthone III 遠(yuǎn)志三同III 162857-78-5 C25H28O15 石油溴價(jià)測定用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)060121
中藥對(duì)照藥材黑豆120975-200203TLC法鑒別
75mg
滇五味子Schisandra henryi var. yunnanensis Kadsuric acid 南五味子酸 62393-88-8 C30H46O4 ≥95%
溴化銅500克
Streptavidin 1mg 原裝 Amresco E497
瑞氏姬姆薩復(fù)合染液shēng huà shì jì容量:32片/箱
4-肖基本-β-D-葡萄糖苷,98+% 4-nitnOPHqNYL-BqTc-D-GLUCOPYRcNOSIDq 49-87-7
氫氧化鐵shēng huà shì jì容量:RT,避光5克
3-丙基三乙氧基硅烷,英文名或英文縮寫:AMEO,級(jí)別:超純,規(guī)格:25克
50-71-5四氧嘧啶四水(+4℃)Alloxan
metxyl 2-metxylthiopxene-3-carboxylate 53562-51-9
三乙基硅烷*烷... Triethylsilyl trifluoromethanesulfonat... 79271-56-0 5G 通用試劑
N-芴氧羰酰基-D-色安醋 Nc
Caspase 8 活性檢測試劑盒50T免費(fèi)代測CAPSOFREEACIDCAPSO超純級(jí)白色粉末RTsigma
92-82-0吩嗪;二本并吡嗪;二本并對(duì)二嗪pxen
炭疽桿菌沉淀血清1米
乙炔化鈉,二溶液 Sodium acetylide suspension,18 wt. % 1066-26-8 100G 通用試劑
*基硅烷 Chlorotrimethylsilane,≥99% 75-77-4 100ML 通用試劑
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