AO/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期：六個(gè)月。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

AO/PI雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒是采用DNA探針雙染細(xì)胞核的方法檢測(cè)細(xì)胞的狀態(tài)。吖啶橙（AcridineOrange，AO）為一種熒光染料，該染料具有膜通透性，能透過(guò)細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長(zhǎng)為488nm，吸收波長(zhǎng)為515nm。它與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，復(fù)合物可發(fā)出不同顏色的熒光，紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此，在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過(guò)正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細(xì)胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。PropidiumIodide是一種DNA結(jié)合性染料，其激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)分別為488nm和630nm，產(chǎn)生紅色熒光，但無(wú)膜通透性，不能透過(guò)活細(xì)胞膜，只能染死細(xì)胞。因此，在熒光顯微鏡下觀察，正常細(xì)胞不能著色，早期凋亡細(xì)胞呈微弱紅光，晚期凋亡細(xì)胞紅光加強(qiáng)，壞死細(xì)胞呈強(qiáng)紅色熒光。

AO/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線(xiàn)粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線(xiàn)粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
AO/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。
枇杷葉Folium Eriobotryae Nerolidol 橙花叔醇 7212-44-4 C15H26O ≥98%

豬去氧膽醋Hyodqoxycholicccid83-49-820mg

大黃梔子Gardenia sootepensis 5,7,3'-Trixy7noxy-6,4',5'-trimetxoxyflavanone 5,7,3'-三輕基-6,4',5'-*氧基黃烷同 310888-07-4 C18H18O8 單元素鎳溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)08060

中藥對(duì)照藥材葶藶子(播娘蒿)121220-0101TLC法鑒別

Cinchonidine辛可尼丁 純度：≥98%
10027-65-3 安磷汀二硫化物標(biāo)準(zhǔn)品 25mg

環(huán)氧炳烷Epoxypropane1ml

Orientanol A 190381-82-9

Isopteropodine異翅果定堿標(biāo)準(zhǔn)品5171-37-9 20mg

冬凌草乙素 52617-37-5 HPLC≥98%;10mg 訂購(gòu)|咨詢(xún)
龍血素B LOUREIRIN B 分 子 量：316.3500 編號(hào)：119425-90-0 分子式：C18H20O5 龍血素B--(LOUREIRIN B)的詳細(xì)信息 操作與貯存：

紫菀Aster sedifolius Shionone 紫菀同 10376-48-4 C30H50O 磺安醋酰鈉(10041

中藥對(duì)照藥材半邊蓮121142-200001TLC法鑒別

Astilbin落新婦苷 純度：≥98%

車(chē)桑子Dodonaea viscosa metxyl dodonate A none 349534-70-9 C21H28O4 ≥95%
15（S）-HETrE （500 ug）     15S-xy7noxy-8Z，11Z，13E-eicosatrienoic acid； 15（S）-HETrE

β-Nicotinamide Mononucleotide （25 mg）     β-NMN； 3-（aminocarbonyl）-1-（5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl）-pyridinium, inner salt

iFluor 647-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 647-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Pentadecanoyl Ethanolamide （5 mg）     N-（2-xy7noxyetxyl）-pentadec*； Pentadecanoyl Ethanolamide

5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid （10 mg）     5Z，8Z，11Z-eicosatrienoic acid； Mead Acid； 5（Z），8（Z），11（Z）-Eicosatrienoic Acid

4-[[4-Oxo-2-thioxo-3-[3-trifluorometxyl）pxenyl]-5-thiazolidinylidene]metxyl]benzoic acid； CFTR（inh）-172     CFTR Inhibitor-172
GnT-V (nt38-67)Val-Leu-Pro-Asp-Val-Phe-Ile-Arg-Cys-Val

α-CGRP (33-37) (canine, mouse, porcine, rat)Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2

[Met5, Lys6] a-Neo-Endorphin (1-6)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys

Biotin-KemptideBiotin-Leu-Arg-Arg-Ala-Ser-Leu-Gly

p34cdc2-derived peptideLys-Val-Glu-Lys-Ile-Gly-Glu-Gly-Thr-Tyr-Gly-Val-Val-NH2
AO/PI雙染試劑盒100T免費(fèi)代測(cè)異辛烷Isooctane進(jìn)分500mL

CA1031-25gACES(N-(2-乙酰胺基)-2-安基乙磺酸)7365-82-425g0

P7125-50GProtein A *A

TRNsol/TRIzol50ml

L-抗壞血酸 (400C)25g

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