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當(dāng)前位置:上海莼試生物技術(shù)有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)試劑>>細(xì)胞凋亡檢測(cè)>> 吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)
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更新時(shí)間:2017-07-03 13:54:00瀏覽次數(shù):160次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 儀表網(wǎng)procaspase-3激活劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
Caspase 4抑制劑200ul實(shí)驗(yàn)方法
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)夾竹桃Nerium oleander Neridienone B 歐奕二烯酮 B 61671-56-5 C21H28O4 ≥98%
多巴L-dopc1929-9-720mg
光葉巴豆Croton laevigatus 5,6,7,8-Tetrametxoxycoumarin 5,6,7,8-四甲氧基 56317-15-8 C13H14O6 單元素鐠溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080564
中藥對(duì)照藥材松塔121219-200502TLC法鑒別
Diosmetin香葉木素 純度:≥98%
產(chǎn)品名稱:吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存。
有效期: 一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
吖啶橙(AcridineOrange,AO)為一種熒光染料,該染料具有膜通透性,能透過細(xì)胞膜,使核DNA和RNA染色。其激發(fā)波長(zhǎng)為488nm,吸收波長(zhǎng)為515nm。它與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別,復(fù)合物可發(fā)出不同顏色的熒光,紅色熒光為AO-DNA(F>600nm),綠色熒光為AO-RNA或單鏈DNA(F>530nm)。因此,在熒光顯微鏡下觀察,吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜,使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光;而在凋亡細(xì)胞中,因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷,形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光,或黃綠色碎片顆粒;而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染,因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光,由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞。
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng) 離心集液。
2.7-AAD避光保存及使用。
3.7-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)5~15min;
3.加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來說,也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
(1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
(2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
(3)在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
(4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
(5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTA與Ca2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
(1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer;
(2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心5~10分鐘,收集細(xì)胞;
(3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS(4℃)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心5~10分鐘,洗滌細(xì)胞;
(4)加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
(5)Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μL的Annexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
(6)PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
(7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
10016-20-3 α-環(huán)糊精標(biāo)準(zhǔn)品 500mg
梣同Fraxinellone8808-6-0HPLC≥98%,20mg/支
N-FeruloyloctopaMine N-阿魏酰章魚安 66648-44-0
增效醚 標(biāo)準(zhǔn)品 號(hào):100mg
α-胡蘿卜素 7488-99-5 HPLC≥98%;20mg 訂購(gòu)|咨詢
黃芩素 Baicalein (≥98%,HPLC) 491-67-8 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
紫菀或背葉 Radix Asteris Aralia chinensis Linn. var. nuda Nakai 木栓同 559-74-0 C30H50O ≥98% 賴脯胰島素(Y0000 48
對(duì)照品安魯米特0276-9801檢查
扶西汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品79088-29-2 15mg扶西汀相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品
蘇木Bauhinia corymbosa Roxb. Brazilin 巴西蘇木素 474-07-7 C16H14O5 ≥98%
15(S)-HETrE (50 ug) 15S-xy7noxy-8Z,11Z,13E-eicosatrienoic acid; 15(S)-HETrE
β-Nicotinamide Mononucleotide (10 mg) β-NMN; 3-(aminocarbonyl)-1-(5-O-phosphono-β-D-ribofuranosyl)-pyridinium, inner salt
iFluor 594-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml iFluor 594-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Pentadecanoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-pentadec*; Pentadecanoyl Ethanolamide
13(Z)-Docosenoic Acid (500 mg) 13Z-docosenoic acid; Erucic Acid; 13(Z)-Docosenoic Acid
D-( Chlorampxenicol
GM-CSF (96-112)Cys-Ala-Thr-Gln-Ile-Ile-Thr-Phe-Glu-Ser-Phe-Lys-Glu-Asn-Leu-Lys-Asp
α-CGRP (31-37) (canine, mouse, rat)Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe- NH2
[Met5, Lys6, Arg7] a-Neo-Endorphin (1-7)Tyr-Gly-Gly-Phe-Met-Lys-Arg
Biotin-Intermedin (human)Biotin-Thr-Gln-Ala-Gln-Leu-Leu-Arg-Val-Gly-Cys-Val-Leu-Gly-Thr-Cys-Gln-Val-Gln-Asn-Leu-Ser-His-Arg-Leu-Trp-Gln-Leu-Met-Gly-Pro-Ala-Gly-Arg-Gln-Asp-Ser-Ala-Pro-Val-Asp-Pro-Ser-Ser-Pro-His-Ser-Tyr-NH2
OxytocinCys-Tyr-Ile-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2(Disulfide bridge:Cys1-Cys6)
吖啶橙染色試劑盒100T售后服務(wù)乙基本etxyl-benzenAR500mL
CA1081S-5mg乙酰輔酶 A102029-73-25mg0
C2037-25MGCytochrome C 細(xì)胞色素 C(牛心)9007-43-625mg
TRNsol LS Reagent50ml
L-精安酸鹽酸鹽25g
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