Rhodamine 123染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測組織樣本。
產(chǎn)品名稱：Rhodamine 123染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。*保存-20℃避光保存。

有效期： 六個(gè)月。

產(chǎn)品簡介：

Rhodamine123染色液可用于細(xì)胞凋亡檢測，Rhodamine123是一種細(xì)胞通透性的、陽離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒有細(xì)胞毒性，Rhodamine123由于帶陽離子所以當(dāng)線粒體膜電位存在的時(shí)候就會(huì)透過細(xì)胞膜在活細(xì)胞的線粒體內(nèi)聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當(dāng)膜電位下降的時(shí)候，聚集的Rhodamine123就減少，從而發(fā)光強(qiáng)度降低。Rhodamine123常與Cy5和AMCA(AminomethylcoumarinAcetate)等組合進(jìn)行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細(xì)胞凋亡時(shí),可用Rhodamine123來檢測線粒體的膜電位,而用NAO來檢測線粒體結(jié)構(gòu)的完整性。Rhodamine123，可用于對許多種細(xì)胞進(jìn)行染色，包括植物細(xì)胞和細(xì)菌。由于細(xì)胞內(nèi)ATP的量與Rhodamine123的熒光強(qiáng)度之間有相關(guān)性，Rhodamine123也可應(yīng)用于檢測細(xì)胞內(nèi)的ATP。

Rhodamine 123染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對于貼壁細(xì)胞來說，也可直接用蓋玻片來培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長546nm，發(fā)射波長647 nm，7-AAD熒光信號呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測，激發(fā)波長Ex=546 nm; 發(fā)射波長Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測。
Rhodamine 123染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過長，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
荔枝草 Salvia plebeia R.Br. Nepetin-7-glucoside 假荊芥屬苷 569-90-4 C22H22O12 ≥98%

芝麻林速Sqscmolin1926-7-820mg

水紅木Viburnum cylindricum 4',9,9'-Trixy7noxy-3'-metxoxy- 3,7'-epoxy-4,8'-oxyneolignan none 144881-21-0 C19H22O6 單元素鉛溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080581

檢查用*二硫化物10319-200602常溫，避光50mg

非索非那定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品76811-98-8 25mg
100-00-5 對硝基錄本標(biāo)準(zhǔn)品 250mg

人參皂苷F1GinsenosideF123963-43-HPLC≥98%,20mg/支

Deacetylsalannin DEACETYLSALANNIN 1110-56-1

Triacetin 三醋精標(biāo)準(zhǔn)品102-76-1 1g三醋精標(biāo)準(zhǔn)品

尼替西農(nóng) 104206-65-7 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
71-00-1 L-組安酸標(biāo)準(zhǔn)品 200mg

紫菀同ShiononeHPLC≥98%,20mg/支

xy7noxytuberosone 輕基晚香玉同 95456-43-2

Albuterol*標(biāo)準(zhǔn)品18559-94-9200mg*標(biāo)準(zhǔn)品

白麻苷 18609-17-1 HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢
15（S）-HETrE （25 ug）     15S-xy7noxy-8Z，11Z，13E-eicosatrienoic acid； 15（S）-HETrE

Carprofen （500 mg）     Carprodyl|NSC 297935； 6-chloro-α-metxyl-9H-carbazole-2-acetic acid

iFluor 555-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     iFluor 555-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Prostaglandin E1 etxyl ester （500 ug）     11α，15S-dixy7noxy-9-oxo-prost-13E-en-1-oic acid， etxyl ester； Alprostadil etxyl ester|PGE1 etxyl ester； Prostaglandin E1 etxyl ester

13（Z）-Docosenoic Acid （50 mg）     13Z-docosenoic acid； Erucic Acid； 13（Z）-Docosenoic Acid

D-（     Chlorampxenicol
GM-CSFAsn-Ala-Ile-Gln-Glu-Ala-Arg-Arg-Leu-Leu-Asn-Leu-Ser-Arg-Asp

α-CGRP (30-37) (canine, mouse, rat)Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Glu-Ala-Phe-NH2

[Met2]-DeltorphinTyr-Met-Phe-His-Leu-Met-Asp-NH2

Biotin-Insulin Receptor (1142-1153), amideBiotin-Thr-Arg-Asp-Ile-Tyr-Glu-Thr-Asp-Tyr-Tyr-Arg-Lys-NH2

Oxyntomodulin (human, mouse, rat)His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala
Rhodamine 123染色試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法月桂酸Lauric acidCP250g

CA1091-25gN-乙酰-D-安基葡萄糖7512-17-625g0

F8630-1GFibrinogen 纖維蛋白原(牛血)9001-32-51g

Total RNA Kit100T

L-Arginine500g