產(chǎn)品名稱：Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件：2-8℃避光保存。*保存于-20℃避光。

有效期：一年

Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1．微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
2．7-AAD避光保存及使用。
3．7-AAD為潛在致癌物，操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施，穿*、戴手套等。
4．本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí)，細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105，，不*用于檢測(cè)組織樣本。
Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1．懸浮細(xì)胞離心（2000rpm離心5min）收集；貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次（2000rpm離心5min）收集1~5×105細(xì)胞；
2．加入5μL 7-AAD染液，混勻；室溫、避光、反應(yīng)5～15min；
3．加入500μL的1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞；
4．請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi)，進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A．熒光顯微鏡觀察
1．滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上，并用蓋玻片蓋上細(xì)胞；
2．對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō)，也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡；
（1）將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng)，用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，并設(shè)立陰性對(duì)照組；
（2）用PBS洗滌細(xì)胞兩次；
（3）在500μL 的1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液，混勻；
（4）將上述溶液滴加于蓋玻片表面，使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋；
（5）避光、室溫反應(yīng)5 min。
3．將蓋玻片倒置于載玻片上，于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm，發(fā)射波長(zhǎng)647 nm，7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B．流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè)，激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2％的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí)，注意必須*清除EDTA：在標(biāo)記前用1×PBS或1×bindingbuffer洗滌，清除EDTA，以免殘余的EDTA與Ca2＋螯合，影響Annexin V的結(jié)合。
（1）用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer；
（2）細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集：離心5分鐘；貼壁細(xì)胞：用不含EDTA的*消化收集后（注：*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)，否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合），于室溫2000rpm離心5～10分鐘，收集細(xì)胞；
（3）細(xì)胞洗滌：用預(yù)冷1×PBS（4℃）重懸細(xì)胞一次，2000rpm離心5～10分鐘，洗滌細(xì)胞；
（4）加入300μL 的1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞；
（5）Annexin V-FITC標(biāo)記：加入5μL的Annexin V-FITC混勻后，避光，室溫孵育15分鐘；
（6）PI標(biāo)記：上機(jī)前5分鐘再加入5μL的PI染色。
（7）上機(jī)前，補(bǔ)加200μL的1×Binding Buffer。
豆科植物補(bǔ)骨脂 Fructus Psoraleae的果實(shí) Neobavaisoflavone 新補(bǔ)骨脂異黃酮 41060-15-5 C20H18O4 ≥98%

藏紅花醋Crocqtin302-40-220mg

何首烏 Polygonum multiflorum Thunb. 2,3,5,4'-Tetraxy7noxystilbene- 2-Ο-β-D-glucoside 何首烏苷 55327-45-2 C20H22O9 單元素銪溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080567

含量測(cè)定維A酸100307-2009022-8℃，避光50mg

*相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品25mg
(≥98%,HPLC) 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

角葉鞘柄木Toricellia angulata 71035-06-8 C18H24O12 ≥95% 戈舍瑞林，混合物(Y0000194

對(duì)照品本磺酸安錄地平100374-200301含量測(cè)定

Finasteride *標(biāo)準(zhǔn)品98319-26-7 200mg*標(biāo)準(zhǔn)品

金粟蘭Chloranthus spicatus Chlorahololide D none 943136-39-8 C38H44O11 ≥95%
吳茱萸Evodia rutaecarpa Phellamurin (二氫)黃柏甙 52589-11-4 C26H30O11 ≥96.5%

棕櫚醋Pclmiticccid20mg/支

刺桐Erythrina arborescens Wighteone 5,7,4'三輕基-6-異烯基異黃同 51225-30-0 C20H18O5 ≥99%

中藥對(duì)照藥材膽木121336-200401TLC法鑒別

Periplocin杠柳毒苷純度：≥97%
1-Arachidonoyl Glycerol-d5 （100 ug）     5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid， 1-glycerol-1，1，2，3，3-d5 ester； 1-AG-d5； 1-Arachidonoyl Glycerol-d5

S-（4-nitnobenzyl）-6-thioinosine （100 mg）     NBMPR|NBTI|NSC 296962； S-4-nitnopxenylmetxyl-6-thioinosine

RPE-iFluor 647-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     RPE-iFluor 647-streptavidin conjugate 1 mg/ml

N-acetyl-3，4-metxylenedioxymetxcathinone （10 mg）     N-

Linoleic Acid （peroxide free） （250 mg）     9Z，12Z-octadecadienoic acid； fairic Acid； Linoleic Acid （peroxide free）

2-（Phosphonometxyl）pentane-1，5-dioi     NAALDase Inhibitor， Pmpe
GLP-1 (9-36) amide (human, bovine, guinea pig, mouse, porcine, rat)Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-NH2

XeninMet-Leu-Thr-Lys-Phe-Glu-Thr-Lys-Ser-Ala-Arg-Val-Lys-Gly-Leu-Ser-Phe-His-Pro-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu

[Leu31,Pro34]-Neuropeptide Y (13-36) (human, rat)Pro-Ala-Glu-Asp-Met-Ala-Arg-Tyr-Tyr-Ser-Ala-Leu-Arg-His-Tyr-Ile-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2

Biotin-a-CGRP (human)Biotin-Ala-Cys-Asp-Thr-Ala-Thr-Cys-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 (Disulfide bridge:Cys2-Cys6)

Orexin A, bovine, human, mouse, ratPyr-Pro-Leu-Pro-Asp-Cys-Cys-Arg-Gln-Lys-Thr-Cys-Ser-Cys-Arg-Leu-Tyr-Glu-Leu-Leu-His-Gly-Ala-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Leu-NH2(Disulfide bridge: Cys6-Cys12, Cys7-Cys14)
Annexin V-FITC / 7-AAD 雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒100T實(shí)驗(yàn)方法派啶pipeni7ineAR100mL

CA1321-50mg4-(2-安乙基)本磺酰扶 鹽酸鹽(AEBSF)30827-99-750mg0

ER0592Not I1500 units

Plasmid Mini Kit100T

Iodoacetamide25g