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更新時間:2017-07-03 13:33:22瀏覽次數(shù):194次
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細胞膜電位檢測試劑盒100T免費代測儲存條件: 膜電位探針-20℃避光保存,避免反復凍融; 檢測緩沖液2-8℃保存。
有效期:一年。
細胞膜電位檢測試劑盒100T免費代測實驗操作步驟:
1、液的配制:
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ,其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類推;對于細胞懸液每50~100 萬細胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 (200×),按照每50μL JC-1(200×)加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液(5 ×),混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽性對照的設置:
把試劑盒中提供的CCCP(10mM )*按照1 ∶1000 的比例加入到細胞培養(yǎng)液中,稀釋至10uM ,處理細胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ,進行線粒體膜電位的檢測。對于大多數(shù)細胞,通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會*喪失,JC-1 染色后觀察應呈綠色熒光;而正常的細胞經(jīng)JC-1 染色后應顯示紅色熒光。對于特定的細胞,CCCP 的作用濃度和作用時間可能有所不同,需自行參考相關文獻資料決定。
3、對于懸浮細胞:
(1)取 10~60 萬細胞,重懸于 0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
(2)加入 0.5mL JC-1 染色工作液,顛倒數(shù)次混勻。細胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
(3)在孵育期間,按照每 1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入 4mL 蒸餾水的比例,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),并放置于冰浴。
(4)37℃孵育結束后,600g 4 ℃離心3 ~4 分鐘,沉淀細胞。棄上清,注意盡量不要吸除細胞。
(5)用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌 2 次:加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g 4 ℃離心 3~4 分鐘,沉淀細胞,棄上清。
(6)再用適量 JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察,也可以用熒光分光光度計檢測或流式細胞儀分析。
細胞膜電位檢測試劑盒100T免費代測注意事項
(1)本試劑只適用于實驗,不適用于臨床檢測;
(2)PI(propidium iodide,碘化丙錠)有毒性,能通過皮膚吸收,對眼睛有刺激作用,使用時需戴手套;
(3)Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì),在操作時請注意避光。在處理和標記時,盡可能在暗處進行。在孵育階段,用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細胞標記后,在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察;
(4)整個操作過程動作要盡量輕柔,勿用力吹打細胞,盡量在4℃下操作,以免影響細胞狀態(tài)。
(5)在細胞洗滌的后一步,請盡量將上清棄凈,以免PBS殘留,有可能會影響實驗結果。
(6)為防止熒光衰變,宜在1小時內(nèi)進行流式檢測。
(7)PI染色時間過長有可能造成檢測的凋亡率偏高,建議首*行Annexin V-FITC染色,短可在上機前5分鐘再加入PI染色。
魚腥草Houttuynia cordata Neoechinulin A 新海膽靈 A 51551-29-2 C19H21N3O2 ≥95%
紫莖女貞苷CqupctoriumprivqtglycosidqC20mg
菖蒲Acorus calamus 2,4,5-Trimetxoxybenzdehyde 2,4,5-*氧基本甲全 4460-86-0 C10H12O4 單元素釔溶液成分分析標準物質(zhì)080576
中藥對照藥材皂角刺121210-200502TLC法鑒別
sipeimine西貝堿純度:≥98%
(R型)人參皂苷Rg2 Ginsenoside Rg2 (≥98%,HPLC) Null 20MG 標準品
黃芩Scularia baicalesis 5-輕基-7-乙酰氧基-8-甲氧基黃同 95480-80-1 C18H14O6 ≥98% 單硬脂酸甘油酯(G0400008
對照品溴丙胺肽林100471-200301HPLC法含量測定用
二類殘留溶劑-N,N-二甲基甲先胺標準品1.2ml×3ampules二類殘留溶劑-N,N-二甲基甲先胺標準品
夏雪銀線蕨Pteris cretica Creticoside C 大葉鳳尾蕨甙C 53452-34-9 C26H44O8 ≥95%
63-42-3 無水乳糖標準品 100mg
棕櫚醋Palmiticacid1927-10-3HPLC≥98%,20mg/支
Triptocallic acid A (3ALPHA,22ALPHA)-3,22-二輕基烏蘇-12-烯-30-酸 190906-61-7
烯啶蟲胺 標準品 號:120738-89-8 100MG
二乙酰基大花旋覆花內(nèi) 151513-70-1 HPLC≥98%;10mg 訂購|咨詢
1-Arachidonoyl Glycerol-d5 (5 mg) 5Z,8Z,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid, 1-glycerol-1,1,2,3,3-d5 ester; 1-AG-d5; 1-Arachidonoyl Glycerol-d5
CMP-Sialic Acid (wo7ium salt) (1 mg) CMP-Neu5Ac; N-acetyl-2-(xy7nogen 5’-cytidylate)-β-neuneminic acid, monowo7ium salt
HRP-標記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml HRP-streptavidin conjugate 1 mg/ml
Benocyclidine-d10 (1 mg) 1-(1-benzo[b]thien-2-ylcyclohexyl)-2,2,3,3,4,4,5,5,6,6-d10-pipeni7ine; BCP-d10|Benzothiopxenylcyclohexylpipeni7ine-d10|BTCP-d10|GK 13-d1Benocyclidine-d10
Linoleoyl Ethanolamide (10 mg) N-(2-xy7noxyetxyl)-9Z,12Z-octadecadienamide; Linoleoyl Ethanolamide
(E)-N-xy7noxy-3-[3-(pxenylsulfamoyl)pxenyl]prop-2-enamide; Belinostat PXD101
GLP-2 (rat)His-Ala-Asp-Gly-Ser-Phe-Ser-Asp-Glu-Met-Asn-Thr-Ile-Leu-Asp-Asn-Leu-Ala-Thr-Arg-Asp-Phe-Ile-Asn-Trp-Leu-Ile-Gln-Thr-Lys-Ile-Thr-Asp
Xenopsin-Related Peptide 1 (XP-1)His-Pro-Lys-Arg-Pro-Trp-Ile-Leu
[Leu31,Pro34]-Peptide YY (human)Tyr-Pro-Ile-Lys-Pro-Glu-Ala-Pro-Gly-Glu-Asp-Ala-Ser-Pro-Glu-Glu-Leu-Asn-Arg-Tyr-Tyr-Ala-Ser-Leu-Arg-His-Tyr-Leu-Asn-Leu-Leu-Thr-Arg-Pro-Arg-Tyr-NH2
Biotin-Amyloid β-Protein (1-42)Biotin-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala
Orexin B, rat, mouseArg-Pro-Gly-Pro-Pro-Gly-Leu-Gln-Gly-Arg-Leu-Gln-Arg- Leu-Leu-Gln-Ala-Asn-Gly-Asn-His-Ala-Ala-Gly-Ile-Leu-Thr-Met-NH2
細胞膜電位檢測試劑盒100T免費代測1,2-丙二醇1,2-PropanediolAR500mL
CA1301-10g3-安基-9-乙基咔唑(AEC)132-32-110g0
ER0581Nde I500 units
質(zhì)粒大量提取試劑盒(非柱式法)5T
異丙基-β-D-硫代半乳糖苷10g
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