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Rho123細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法

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更新時(shí)間:2017-07-03 13:32:58瀏覽次數(shù):149次

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產(chǎn)品名稱:Rho123細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法
儲(chǔ)存條件: RHO123 -20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。 孵育緩沖液 2-8℃保存。

有效期:一年。

Rho123細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法使用注意事項(xiàng)
1.微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。
27-AAD避光保存及使用。
37-AAD為潛在致癌物,操作時(shí)請(qǐng)采取防護(hù)措施,穿*、戴手套等。
4.本試劑盒適用于檢測(cè)活細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測(cè)時(shí),細(xì)胞數(shù)量不以應(yīng)低于1×105,,不*用于檢測(cè)組織樣本。
Rho123細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法操作方法
1.懸浮細(xì)胞離心(2000rpm離心5min)收集;貼壁細(xì)胞用*消化收集用PBS洗滌細(xì)胞二次(2000rpm離心5min)收集1~5×105細(xì)胞;
2.加入5μL 7-AAD染液,混勻;室溫、避光、反應(yīng)515min
3.加入500μL1×Assays Buffer懸浮細(xì)胞;
4.請(qǐng)?jiān)?/span>1 hour內(nèi),進(jìn)行下述熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀的觀察和檢測(cè)。
A.熒光顯微鏡觀察
1.滴一滴上述染色后的細(xì)胞懸液于載玻片上,并用蓋玻片蓋上細(xì)胞;
2.對(duì)于貼壁細(xì)胞來(lái)說(shuō),也可直接用蓋玻片來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;
1)將細(xì)胞于蓋玻片上生長(zhǎng),用適當(dāng)?shù)牡蛲稣T導(dǎo)劑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,并設(shè)立陰性對(duì)照組;
2)用PBS洗滌細(xì)胞兩次;
3)在500μL 1×Assays Buffer中加入5μL7-AAD染液,混勻;
4)將上述溶液滴加于蓋玻片表面,使長(zhǎng)有細(xì)胞的蓋玻片表面均勻覆蓋;
5)避光、室溫反應(yīng)5 min。
3.將蓋玻片倒置于載玻片上,于熒光顯微鏡下觀察激發(fā)波長(zhǎng)546nm,發(fā)射波長(zhǎng)647 nm,7-AAD熒光信號(hào)呈紅色。
B.流式細(xì)胞儀分析
用流式細(xì)胞儀檢測(cè),激發(fā)波長(zhǎng)Ex=546 nm; 發(fā)射波長(zhǎng)Em=647 nm。
7-AAD紅色熒光建議使用FL3通道檢測(cè)。
Rho123細(xì)胞膜電位檢測(cè)試劑盒50T實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)步驟
貼壁細(xì)胞需用0.25%的*消化。注意過(guò)度消化可損傷細(xì)胞。在消化時(shí)可加2%的BSA可防止消化過(guò)度。如果用含EDTA的*消化時(shí),注意必須*清除EDTA:在標(biāo)記前用1×PBS1×bindingbuffer洗滌,清除EDTA,以免殘余的EDTACa2+螯合,影響Annexin V的結(jié)合。
1)用去離子水將10×Binding Buffer稀釋成1×Binding Buffer
2)細(xì)胞收集。懸浮細(xì)胞收集:離心5分鐘;貼壁細(xì)胞:用不含EDTA的*消化收集后(注:*消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞膜上磷脂酰*與Annexin V-FITC的結(jié)合),于室溫2000rpm離心510分鐘,收集細(xì)胞;
3)細(xì)胞洗滌:用預(yù)冷1×PBS4)重懸細(xì)胞一次,2000rpm離心510分鐘,洗滌細(xì)胞;
4)加入300μL 1×Binding Buffer 懸浮細(xì)胞;
5Annexin V-FITC標(biāo)記:加入5μLAnnexin V-FITC混勻后,避光,室溫孵育15分鐘;
6PI標(biāo)記:上機(jī)前5分鐘再加入5μLPI染色。
7)上機(jī)前,補(bǔ)加200μL1×Binding Buffer。
水龍骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei (Kunze) J. Sm.的干燥根莖 Neoeriocitrin 新北美圣草苷 13241-32-2 C27H32O15 98%

紫莖女貞苷BqupctoriumprivqtglycosidqB20mg

狼牙刺Sophora viciifolia 2,4,6,6-Tetrametxyl-3(6H)-pyridinone 2,4,6,6-四甲基-3(6H)-比啶同 203524-64-5 C9H13NO 單元素鋅溶液成分分析標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)080607

含量測(cè)定*100310-200201常溫,避光50mg

Perpxen Sulfoxide*亞砜標(biāo)準(zhǔn)品10078-25-8 100mg
(R)人參皂苷Rg3 Ginsenoside Rg3 (98%,HPLC) Null 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品

綿棗兒Scilla scilloides 3-(4-輕基本亞甲基)-5-輕基-7-甲氧基色滿-4- 259653-54-8 C17H14O5 95% 單心酸甘油酯(Y0000794

對(duì)照品*100472-200401HPLC法含量測(cè)定用

二類(lèi)殘留溶劑-2-甲氧基乙醇標(biāo)準(zhǔn)品109-86-4 (2-... 1.2ml×3ampules二類(lèi)殘留溶劑-2-甲氧基乙醇標(biāo)準(zhǔn)品

番紅花 Crocus sativus L. Crocin I 西紅花苷I; 94238-00-3 C44H64O24 98%
?;撬?/span> Taurine 107-35-7 20mg

棕櫚醋Palmiticacid109620mg

D-arabinitol D-阿拉伯糖醇 488-82-4

馬卡因高麗槐素19908-48-6Maackiain

山梔子苷B;Gardenoside 24512-62-7 20mg 訂購(gòu)|咨詢
2-Arachidonoyl Glycerol-d8 25 ug     5Z,8Z,11Z14Z-eicosatetraenoic-5,68,911,1214,15-d8 acid, 2-glyceryl ester; 2-AG-d8 2-Arachidonoyl Glycerol-d8

CMP-Sialic Acid wo7ium salt 10 mg     CMP-Neu5Ac; N-acetyl-2-xy7nogen 5-cytidylate-β-neuneminic acid, monowo7ium salt

AP-標(biāo)記鏈霉親和素偶聯(lián)物 1 mg/ml     AP-streptavidin conjugate 1 mg/ml

Benocyclidine-d10 10 mg     1-1-benzo[b]thien-2-ylcyclohexyl-2,2,3,3,44,5,56,6-d10-pipeni7ine BCP-d10|Benzothiopxenylcyclohexylpipeni7ine-d10|BTCP-d10|GK 13-d1Benocyclidine-d10

Linoleoyl Ethanolamide 100 mg     N-2-xy7noxyetxyl-9Z,12Z-octadecadienamide Linoleoyl Ethanolamide

E-N-xy7noxy-3-[3-pxenylsulfamoylpxenyl]prop-2-enamide; Belinostat     PXD101
Glucagon (1-29), bovine, human, porcineHis-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr

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[Leu8, Des-Arg9]-BradykininArg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Leu

Biotin-Angiotensin I, humanBiotin-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe-His-Leu

Orn8, Urotensin II, humanGlu-Thr-Pro-Asp-Cys-Phe-Trp-Orn-Tyr-Cys-Val
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