我司JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本著標(biāo)準(zhǔn)*、質(zhì)量*、服務(wù)*、信譽(yù)*的宗旨，為客戶提供輕松便捷，安全可靠的網(wǎng)上采購(gòu)模式！我們將竭誠(chéng)為您服務(wù),咨詢！
JC-1線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存條件：JC-1 -20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。孵育緩沖液2-8℃保存。
有效期：一年。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)標(biāo)志性事件。JC-1是一種廣泛用于檢測(cè)線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)的理想熒光探針?？梢詸z測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時(shí)，JC-1聚集在線粒體的基質(zhì)中，形成聚合物，488nm激發(fā)時(shí)的大發(fā)射波長(zhǎng)為590nm，可以產(chǎn)生紅色熒光，在流式圖上表現(xiàn)為FL1和FL2雙陽(yáng)性；在線粒體膜電位較低時(shí)，JC-1不能聚集在線粒體的基質(zhì)中，此時(shí)JC-1為單體，488nm激發(fā)時(shí)大發(fā)射波長(zhǎng)為527nm，可以產(chǎn)生綠色熒光，形成流式圖中所有細(xì)胞FL1均為陽(yáng)性。凋亡細(xì)胞則大多為FL1單陽(yáng)性。這樣就可以非常方便地通過(guò)熒光顏色的轉(zhuǎn)變來(lái)檢測(cè)線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對(duì)比例來(lái)衡量線粒體去極化的比例。通過(guò)JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以很容易地檢測(cè)到細(xì)胞膜電位的下降，同時(shí)也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個(gè)檢測(cè)指標(biāo)。
線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)可以快速靈敏地檢測(cè)細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位變化，可以用于早期的細(xì)胞凋亡檢測(cè)。試劑盒染料與其他的陽(yáng)離子染料如DiOC6(3)和羅丹明123相比，特異性更高，對(duì)線粒體膜電位變化的特異性高于質(zhì)膜電位變化，對(duì)線粒體去極化檢測(cè)的檢測(cè)*性更好；紅綠色熒光強(qiáng)度比率只受線粒體膜電位的變化，不受線粒體大小，形狀，密度的差異干擾；檢測(cè)靈敏度強(qiáng)，對(duì)細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)的微小異質(zhì)性都能辨別；
實(shí)驗(yàn)操作步驟：
1、液的配制：
六孔板每孔所需JC-1 染色工作液的量為 1mL ，其他培養(yǎng)器皿的 JC-1 染色工作液的用量以此類(lèi)推；對(duì)于細(xì)胞懸液每50～100 萬(wàn)細(xì)胞需0.5mL JC-1 染色工作液。取適量JC-1 （200×），按照每50μL JC-1（200×）加入 8mL 超純水的比例稀釋JC-1 。劇烈震蕩充分溶解并混勻 JC-1 。然后再加入2mL JC-1 染色緩沖液（5 ×），混勻后即為 JC-1 染色工作液。
2、陽(yáng)性對(duì)照的設(shè)置：
    把試劑盒中提供的CCCP（10mM ）*按照1 ∶1000 的比例加入到細(xì)胞培養(yǎng)液中，稀釋至10uM ，處理細(xì)胞 20 分鐘。隨后按照下述方法裝載 JC-1 ，進(jìn)行線粒體膜電位的檢測(cè)。對(duì)于大多數(shù)細(xì)胞，通常10uM CCCP處理 20 分鐘后線粒體的膜電位會(huì)*喪失，JC-1 染色后觀察應(yīng)呈綠色熒光；而正常的細(xì)胞經(jīng)JC-1 染色后應(yīng)顯示紅色熒光。對(duì)于特定的細(xì)胞，CCCP 的作用濃度和作用時(shí)間可能有所不同，需自行參考相關(guān)文獻(xiàn)資料決定。
3、對(duì)于懸浮細(xì)胞：
（1）取 10～60 萬(wàn)細(xì)胞，重懸于 0.5mL 細(xì)胞培養(yǎng)液中，細(xì)胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅。
（2）加入 0.5mL JC-1 染色工作液，顛倒數(shù)次混勻。細(xì)胞培養(yǎng)箱中 37 ℃孵育20 分鐘。
（3）在孵育期間，按照每 1mL JC-1 染色緩沖液（5×）加入 4mL 蒸餾水的比例，配制適量的JC-1 染色緩沖液（1×），并放置于冰浴。
（4）37℃孵育結(jié)束后，600g 4 ℃離心3 ～4 分鐘，沉淀細(xì)胞。棄上清，注意盡量不要吸除細(xì)胞。
（5）用JC-1 染色緩沖液（1×）洗滌 2 次：加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。再加入 1mL JC-1 染色緩沖液（1×）重懸細(xì)胞，600g 4 ℃離心 3～4 分鐘，沉淀細(xì)胞，棄上清。
（6）再用適量 JC-1 染色緩沖液（1×）重懸后，用熒光顯微鏡或激光共聚焦顯微鏡觀察，也可以用熒光分光光度計(jì)檢測(cè)或流式細(xì)胞儀分析。
注意事項(xiàng)
（1）本試劑只適用于實(shí)驗(yàn)，不適用于臨床檢測(cè)；
（2）PI（propidium iodide，碘化丙錠）有毒性，能通過(guò)皮膚吸收，對(duì)眼睛有刺激作用，使用時(shí)需戴手套；
（3）Annexin V-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。在處理和標(biāo)記時(shí)，盡可能在暗處進(jìn)行。在孵育階段，用鋁箔包裹容器或置于抽屜中。細(xì)胞標(biāo)記后，在暗室內(nèi)用顯微鏡觀察；
（4）整個(gè)操作過(guò)程動(dòng)作要盡量輕柔，勿用力吹打細(xì)胞，盡量在4℃下操作，以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
（5）在細(xì)胞洗滌的后一步，請(qǐng)盡量將上清棄凈，以免PBS殘留，有可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（6）為防止熒光衰變，宜在1小時(shí)內(nèi)進(jìn)行流式檢測(cè)。
（7）PI染色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)有可能造成檢測(cè)的凋亡率偏高，建議首*行Annexin V-FITC染色，短可在上機(jī)前5分鐘再加入PI染色。

Actin, Muscle Specific 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Actin,Pan 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Actin,Skeletal Muscle 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Actin,Smooth Muscle 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
AFP 0.5ml甲胎蛋白 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Alpha-1-Antichymotrypsin抗胰* 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Amyloid Beta 淀粉樣蛋白 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Androgen Receptor 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Apaf-1 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Apolipoprotein D 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Bak 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Bax 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Bcl-2 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Bcl-6 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
brdu 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Catenin,beta 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
Cadherin,Pan 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝

激活素受體1B抗體 豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISA Kit Pig lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit
雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 豬脂蛋白脂酶(LPL)ELISA Kit Pig lipoprotein lipase,LPL ELISA kit
淀粉樣肽前體蛋白抗體 豬脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA Kit Pig lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
腺苷酸環(huán)化酶2抗體 豬正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA Kit Pig regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted,RANTES ELISA Kit
載脂蛋白C3抗體 豬粘膜血管地址素細(xì)胞黏附分子1(MADCAM1)ELISA Kit Pig mucosal vascular addressin cell adhesion molecule 1,MADCAM1 ELISA kit
載脂蛋白E4抗體 豬粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA Kit Pig mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA Kit
自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體 豬粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA Kit Pig mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 豬粘蛋白/粘液素2(MUC2)ELISA Kit Pig Mucin-2,MUC2 ELISA Kit
磷酸化自噬相關(guān)蛋白4C抗體 豬粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA Kit Pig Mucin-1,MUC1 ELISA Kit
磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 豬早老素2(PS-2)ELISA Kit Pig Presenilin 2,PS-2 ELISA Kit
磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體 豬早老素1(PS-1)ELISA Kit Pig Presenilin 1,PS-1 ELISA Kit
脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體 豬載脂蛋白E(Apo-E)ELISA Kit Pig apolipoprotein E,Apo-E ELISA Kit
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 豬載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA Kit Pig Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit
磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)ELISA Kit Pig steroidacute regulatory protein,StAR ELISA kit
磷酸化細(xì)胞凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1抗體 豬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA Kit Pig inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 豬游離脂肪酸(FFA)ELISA Kit Pig free fatty acids,FFA ELISA Kit
磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 豬游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA Kit Pig free tri-iodothyronine indes,FT3 ELISA kit
磷酸化鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體 豬游離甲狀腺素(FT4)ELISA Kit Pig free thyroxine,FT4 ELISA kit
乙酰*羧化酶抗體 豬胰高血糖素樣肽2(GLP2)ELISA Kit Pig glucagon like peptide 2,GLP2 ELISA kit
磷酸化乙酰*羧化酶抗體 豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)ELISA Kit Pig glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
磷酸化Ack1抗體 豬胰高血糖素(GC)ELISA Kit Pig Glucagon,GC ELISA Kit
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 豬胰*α2(PAMY α2)ELISA Kit Pig Pancreatic Amylase α2,PAMY α2 ELISA Kit