使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽(yáng)性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽(yáng)性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽(yáng)性對(duì)照。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱(chēng)：轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37 PCR試劑盒
貨號(hào):CP97174
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為T(mén)A cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問(wèn)題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
?實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下是轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37 PCR試劑盒公司正在熱銷(xiāo)的產(chǎn)品：
anti- CDC42SE2 antibody資源名稱(chēng)厚垣普奇尼亞菌種屬:Pochonia│chlamydosporia var. chlamydosporia (Goddard) Zare分離基物:番茄根結(jié)線蟲(chóng)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:28

anti- CDC45L antibody資源名稱(chēng)暗色節(jié)菱孢種屬:Arthrinium│phaeospermum (Corda) M.B. Ellis分離基物:南林351楊提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法

anti- CDC5L antibody資源名稱(chēng)膠質(zhì)芽孢桿菌種屬:Bacillus│mucilaginosus Avakyan et al提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長(zhǎng)條件:30存儲(chǔ)條件:定期移植法

anti- CDC6 antibody資源名稱(chēng)阿維丁鏈霉菌種屬:Streptomyces│avidinii Stapley et al分離基物:灘涂提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長(zhǎng)條件:28

anti- CDC6 antibody資源名稱(chēng)刺槐多年臥孔菌（斜面）種屬:Trametes robiniophila Murrill分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3.0g，七水硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20.0g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長(zhǎng)條件:25℃，好氧

anti- Cdc7 Kinase antibody資源名稱(chēng)茄褐紋擬莖點(diǎn)霉種屬:Diaporthe│vexans Gratz分離基物:茄子提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:26

anti- CDCA2 antibody資源名稱(chēng)紅紫韌革菌種屬:Corticium│roseocarneum (Schwein.) Hjortstam提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法

anti- CDCA3 antibody資源名稱(chēng)側(cè)孢芽孢桿菌種屬:Bacillus│laterespore Laubach分離基物:楊柴根系土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長(zhǎng)條件:30

anti- CDCA4 antibody資源名稱(chēng)細(xì)極鏈格孢菌種屬:Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire分離基物:果實(shí)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25

anti- CDCA5 antibody資源名稱(chēng)蘇云金芽孢桿菌多窩亞種種屬:Bacillus│thuringiensis subsp. tolworthi Norris提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:30存儲(chǔ)條件:真空冷凍干燥法；定期移植法

anti- CDCA7 antibody資源名稱(chēng)#銅綠假單孢種屬:Pseudomonas│aeruginosa (Schroeter) Migula分離基物:葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:益生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:141生長(zhǎng)條件:32

anti- CDCA8 antibody資源名稱(chēng)松乳菇（無(wú)法提供）種屬:Lactarius│deliciosus (L.) Gray提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法

anti- CDCP1 antibody資源名稱(chēng)小麥全蝕病種屬:Gaeumannomyces│graminis var. tritici J. Walker分離基物:辣椒葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:植物病原菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CDH10-specific antibody資源名稱(chēng)虎掌菌種屬:Sarcodon│aspratum(Berk.)S.Ito.分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:28

anti- CDH17 antibody資源名稱(chēng)丁香假單胞桿菌番茄致病變種種屬:Pseudomonas│syringae van Hall pv. tomato (Okabe) Young et al.分離基物:番茄葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長(zhǎng)條件:28

anti- CDH23 antibody資源名稱(chēng)葡萄生鏈格孢種屬:Alternaria│viticola Brunaud分離基物:山葡萄提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25存儲(chǔ)條件:定期移植法

anti- CDH26 antibody資源名稱(chēng)樺褐孔菌種屬:Inonotus│obliquus (Ach. ex Pers.) Pilat分離基物:菌核提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:藥用，抗腫瘤，對(duì)胃癌，胃潰瘍有療效培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14

anti- CDK1 antibody資源名稱(chēng)布氏白僵菌（卵孢白僵菌）種屬:Beauveria brongniartii (Sacc.) Petch分離基物:大黑腮金龜提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:鞘翅目昆蟲(chóng)生物防治培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。
轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37 PCR試劑盒小鼠rudimental bovine serum albumin check-up Human SDC1(Syndecan-1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

小鼠 PRG4 Human CLEC3B(Tetranectin) ELISA Kit0.469ng/ml0.78-50ng/ml

小鼠 PKB Human TFF1(Trefoil factor 1) ELISA Kit9.375pg/ml15.6-1000pg/ml

小鼠 CCK Human TFF2(Trefoil factor 2) ELISA Kit18.75pg/ml31.25-2000pg/ml

小鼠 ChAT Human TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit46.875pg/ml78.125-5000pg/ml

小鼠 CETP Human TFPI(Tissue factor pathway inhibitor) ELISA Kit18.75 pg/ml31.25-2000pg/ml

小鼠 CH Human TGFα(Transforming Growth Factor α) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml