使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gamma-hordein基因PCR試劑盒
貨號(hào):CP96874
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測(cè)方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
?實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

以下是大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gamma-hordein基因PCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
Bovine Cr(Creatinine) ELISA Kit資源名稱刺囊毛霉種屬:Mucor spinosus提供形式:凍干物

Bovine Es(ESTROGEN) ELISA Kit資源名稱休哈塔假絲酵母休哈塔亞種種屬:Candida│shehatae var. shehatae分離基物:棘草花金龜體內(nèi)

Bovine Lep(Leptin) ELISA Kit資源名稱棘孢木霉種屬:Trichoderma│asperellum提供形式:凍干物

Bovine Ifabp(Intestinal Fatty Acid Binding Protein) ELISA Kit資源名稱長(zhǎng)枝木霉種屬:Trichoderma│longibrachiatum提供形式:凍干物

Bovine L-FABP(Liver Fatty acid Binding Protein) ELISA Kit資源名稱赤散囊菌種屬:Eurotium│rubrum分離基物:雙望目鏡

Bovine TFF3(Trefoil factor 3) ELISA Kit資源名稱赭曲霉種屬:Aspergillus│ochraceus提供形式:凍干物

Bovine ACTG2(Actin Gamma 2, Smooth Muscle) ELISA Kit資源名稱棒束青霉種屬:Penicillium│clavigerum提供形式:凍干物

Bovine ALPI(Alkaline Phosphatase, Intestinal) ELISA Kit資源名稱鮮綠青霉種屬:Penicillium│viridicatum分離基物:空氣

Bovine CLDN3(Claudin 3) ELISA Kit資源名稱膨端青霉種屬:Penicillium│inflatum分離基物:冷杉根部

Bovine NOS3/eNOS(Nitric oxide synthase, endothelial) ELISA Kit資源名稱粟酒裂殖酵母種屬:Schizosaccharomyces│pombe提供形式:凍干物

Bovine IgE(Immunoglobulin E) ELISA Kit資源名稱降酮短桿菌種屬:Brevibacterium│ketosoreductum分離基物:土壤

Bovine PAP(Plasmin-Antiplasmin Complex) ELISA Kit資源名稱格氏李斯特氏菌種屬:Listeria│grayi提供形式:凍干物

Bovine TL-3(Interleukin-3) ELISA Kit資源名稱布雷正青霉種屬:Eupenicillium│brefeldianum提供形式:凍干物

Bovine DAO(Diamine Oxidase) ELISA Kit資源名稱微細(xì)正青霉種屬:Eupenicillium│parvum分離基物:土壤

Bovine PTGES(Prostaglandin E synthase) ELISA Kit資源名稱紅色籃狀菌種屬:Talaromyces│ruber分離基物:植物塊根

Bovine Jun(Jun Proto-Oncogene) ELISA Kit資源名稱赭鮭色正青霉種屬:Eupenicillium│ochrosalmoneum分離基物:玉米粉

Bovine FG(Fibrinogen) ELISA Kit資源名稱腸沙門氏菌腸亞種種屬:Salmonella│enterica subsp. enterica提供形式:凍干物

Bovine OC(Osteocalcin) ELISA Kit資源名稱摩氏摩根氏菌種屬:Morganella morganii提供形式:凍干物

Bovine PaRathyroid hormone ELISA Kit資源名稱腸沙門氏菌腸亞種旺茲沃思血清型種屬:Salmonella│enterica subsp. enterica serotype Wandsworth提供形式:凍干物

Bovine ALOX12(Arachidonate-12-Lipoxygenase) ELISA Kit資源名稱熱生腫塊芽孢桿菌種屬:Tuberibacillus│calidus分離基物:堆肥
大麥內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)gamma-hordein基因PCR試劑盒BOLA-DQA2大豆酪蛋白瓊脂顆粒培養(yǎng)基大豆酪蛋白瓊脂顆粒培養(yǎng)基用于普通的或營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌以及用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室無菌程度的監(jiān)測(cè)及消毒劑效果的測(cè)試。【檢驗(yàn)原理】酪蛋白胰酶消化物和大豆粉木瓜蛋白酶消化物提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

F11R營(yíng)養(yǎng)肉湯顆粒培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)肉湯顆粒培養(yǎng)基用于一般細(xì)菌培養(yǎng)、復(fù)壯、增菌等，也可用于消毒劑定性消毒效果測(cè)定?！緳z驗(yàn)原理】蛋白胨和粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;能維持均衡的滲透壓。

CD11A|Integrin alpha L|ITGAL|LFA 1|LFA 1A|LFA1A營(yíng)養(yǎng)肉湯顆粒培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)肉湯顆粒培養(yǎng)基用于一般細(xì)菌培養(yǎng)、復(fù)壯、增菌等。【檢驗(yàn)原理】胨和牛肉浸出粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;能維持均衡的滲透壓。

B7-2|CD86|Activation B7-2 antigen|B70|B7-2 antigen|B-lymphocyte activation antigen B7-2|BU63|CD28 antigen ligand 2|CD28LG2|CD86 antigen|CD86 molecule|CTLA-4 counter-receptor B7.2|FUN-1|LAB72|T-lymphocyte activation antigen CD86XLD瓊脂顆粒培養(yǎng)基XLD瓊脂顆粒培養(yǎng)基用于臨床標(biāo)本及食品中沙門氏菌、志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)?！緳z驗(yàn)原理】酵母膏粉提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子;維持均衡的滲透壓;木糖、乳糖、蔗糖為可發(fā)酵糖類，產(chǎn)酸使酚紅指示劑變黃;去氧膽酸鈉抑制革蘭氏陽性菌，但不影響沙門氏菌的生長(zhǎng);硫代硫酸鈉可被某些細(xì)菌還原硫化氫，與檸檬酸鐵銨中的鐵鹽生成黑色硫化鐵;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;酚紅為pH指示劑。

CD8A|T-cell surface glycoprotein CD8 alpha chain|T-lymphocyte differentiation antigen T8|Leu-2EC肉湯顆粒培養(yǎng)基EC肉湯顆粒培養(yǎng)基用于多管發(fā)酵法測(cè)定糞大腸菌群和大腸桿菌的確證試驗(yàn)?！緳z驗(yàn)原理】胰蛋白胨提供碳氮源;3號(hào)膽鹽抑制革蘭氏陽性菌，特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞鏈球菌;乳糖是可發(fā)酵的糖類;磷酸氫二鉀和磷酸二氫鉀為緩沖劑;可維持均衡的滲透壓。

HCK亞鹽胱氨酸增菌液顆粒培養(yǎng)基亞酸鹽胱氨酸增菌液顆粒培養(yǎng)基用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。【檢驗(yàn)原理】蛋白胨提供碳源和氮源滿足細(xì)菌生長(zhǎng)的需求;乳糖是可發(fā)酵的糖類;氫鈉抑制革蘭氏陽性菌和非沙門氏菌的大多數(shù)革蘭氏陰性腸道菌;磷酸鹽是緩沖劑;L-胱氨酸為還原劑。

58 kDa microsomal protein|Disulfide isomerase ER 60|ER protein 57|ER protein 60|ER60|ERp57|ERp60|ERp61|GRP57|GRP58|HsT17083|P58|PDIA3|PI PLC|Protein disulfide isomerase A3玫瑰紅鈉瓊脂顆粒培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基(顆粒培養(yǎng)基)供藥品和生物制品中霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)、分離和培養(yǎng)用。【檢驗(yàn)原理】胨提供碳源和氮源;葡萄糖提供能源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;硫酸鎂提供必須的微量元素;玫瑰紅鈉作為選擇性抑菌劑可抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，并可減緩某些霉菌因生長(zhǎng)過快而導(dǎo)致菌落漫延生長(zhǎng);瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

CCR1膽鹽乳糖顆粒培養(yǎng)基膽鹽乳糖顆粒培養(yǎng)基用于藥品中大腸桿菌和綠膿桿菌的增菌培養(yǎng)?！緳z驗(yàn)原理】胨提供碳氮源;乳糖是可發(fā)酵的糖類;維持均衡的滲透壓;磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀為緩沖劑;牛膽鹽和去氧膽酸鈉為選擇性抑菌劑。