使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系玉米CBH-351染料法qPCR試劑盒
貨號:CP97280
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
?實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

以下是轉(zhuǎn)基因品系玉米CBH-351染料法qPCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- GAS6 antibody資源名稱日本絲孢酵母種屬:Trichosporon│japonicum分離基物:生物樣/闊苞菊/葉提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海酵母培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513

anti- GAS7 antibody資源名稱解脂耶羅維亞酵母種屬:Yarrowia│lipolytica分離基物:生物樣/紅海欖/枝提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海酵母培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513

anti- GAS8 antibody資源名稱金色隱球酵母種屬:Cryptococcus│aureus分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物轉(zhuǎn)化微生物/蛋白含量高培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513

anti- Gastrin antibody資源名稱土微球菌種屬:Micrococcus│terreus分離基物:沉積物/多管沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:未檢測到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、瓊脂酶，檢測到過氧化氫酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:30℃

anti- Gastrokine 1 antibody資源名稱外硫紅螺菌種屬:Ectothiorhodospira│sp.分離基物:水樣/鹽場表層泥水提供形式:其它安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/耐鹽堿菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1004

anti- Gastrokine 1 antibody資源名稱黑?；【N屬:Vibrio│ponticus分離基物:水樣/海水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:科研參考菌株培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GATA1 antibody資源名稱地中?；【N屬:Vibrio│mediterranei分離基物:沉積物/海洋沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GATA1 antibody資源名稱苯基桿菌種屬:Phenylobacterium│sp.分離基物:水樣/上層海水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋可培養(yǎng)細(xì)菌多樣性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:511

anti- GATA2 antibody資源名稱變異白蟻菌種屬:Isoptericola│variabilis分離基物:沉積物/重力活塞取樣提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:海洋放線菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃

anti- GATA3 antibody資源名稱堆肥假單胞菌種屬:Pseudomonas│composti分離基物:土壤/表層土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/土壤耐鹽菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:1001

anti- GATA3 antibody資源名稱芽孢桿菌(加詞待譯)種屬:Bacillus│neizhouensis分離基物:沉積物/深灰色沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/耐堿菌(pH11)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃

anti- GATA4-Specific antibody資源名稱新金色分枝桿菌種屬:Mycobacterium│neoaurum分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/抗腫瘤活性培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃

anti- GATA5 antibody資源名稱淀粉酶鏈霉菌種屬:Streptomyces│diastaticus分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/抗腫瘤活性；產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶；培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃

anti- GATA6 antibody資源名稱反硝化卡斯特蘭尼氏菌種屬:Castellaniella│denitrificans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自苯酚降解菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃

anti- GATAD2B antibody資源名稱鯉鏈霉菌種屬:Streptomyces│carpaticus分離基物:土壤/近海紅樹林土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可用于抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃

anti- GATC antibody資源名稱食溶劑副球菌種屬:Paracoccus│solventivorans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機(jī)污染物降解菌/（潛在的）苯酚降解菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃

anti- GATM antibody資源名稱奧斯陸莫拉氏菌種屬:Moraxella│osloensis分離基物:沉積物/養(yǎng)魚池底泥提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的反硝化菌/以硝酸根為電子受體分離，可用于生物脫氮研究； 產(chǎn)酶微生物/脂酶（三丁酸甘油酯）培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃

anti- GBA antibody資源名稱硝酸鹽還原遠(yuǎn)洋桿菌種屬:Pelagibacterium│nitratireducens分離基物:水樣/表層海水提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471
轉(zhuǎn)基因品系玉米CBH-351染料法qPCR試劑盒大鼠 eNOS/NOS3 Human OAT(Ornithine aminotransferase, mitochondrial) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 ECE2 Human PRG2(Bone marrow proteoglycan) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 ECE1 Human DPP3(Dipeptidyl peptidase 3) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 ETR-A Human RPS19(Ribosomal protein S19) ELISA Kit18.75pg/ml31.25-2000pg/ml

大鼠 ET-1 Human SIGLEC10(Sialic acid-binding Ig-like lectin 10) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 EG-VEGF Human RXRB(Retinoic acid receptor RXR-beta) ELISA Kit0.469ng/ml0.78-50ng/ml

大鼠 ET Human NR1I2(Nuclear receptor subfamily 1 group I member 2) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml