參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系玉米DBT418 PCR試劑盒
貨號(hào):CP97288
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。

以下是轉(zhuǎn)基因品系玉米DBT418 PCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- Geminin antibody資源名稱酸快生芽孢桿菌種屬:Bacillus│acidiceler分離基物:土壤/森林樹下土提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- gephyrin antibody資源名稱抗生素鏈霉菌種屬:Streptomyces│antibioticus分離基物:土壤/死椰子樹芯覆土提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GFAP antibody資源名稱廈門小白卵狀菌種屬:Albidovulum│xiamenense分離基物:水樣/表層溫泉水提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；微生物/嗜熱菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GFAP antibody資源名稱臺(tái)中類芽孢桿菌種屬:Paenibacillus│taichungensis分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.海洋石油污染生物修復(fù); 2.生物活性物質(zhì)篩選培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GFAP antibody資源名稱孤島海桿菌種屬:Marinobacter│gudaonensis分離基物:水樣/深層海水提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1.烷烴及芳烴類降解菌，可用于生物修復(fù)；2.可用于生物催化；3.可用于篩選生物活性物質(zhì)；4.可用于海洋微生物生態(tài)學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821生長條件:25℃

anti- GFI1 antibody資源名稱耐重金屬貪銅菌種屬:Cupriavidus│metallidurans分離基物:沉積物/表層沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821

anti- GFM1 antibody資源名稱橙色鹽單胞菌種屬:Halomonas│lutea分離基物:沉積物/土黃色沉積物5-10cm提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:1、海洋石油污染生物修復(fù)； 2、生物活性物質(zhì)篩選。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:821

anti- GFM2 antibody資源名稱伸長鹽單胞菌種屬:Halomonas│elongata分離基物:生物樣/曬鹽廠設(shè)備表面提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:，用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GFOD2 antibody資源名稱橄欖產(chǎn)色鏈霉菌種屬:Streptomyces│olivochromogenes分離基物:土壤/近海紅樹林土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:可作抗菌活性及抗腫瘤活性研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:12生長條件:28℃

anti- GFP tag antibody資源名稱印度洋海洋螺菌種屬:Marispirillum│indicum分離基物:水樣/深海底層水樣提供形式:凍干物模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；有機(jī)污染物降解菌/石油柴油烴類降解菌；生物轉(zhuǎn)化微生物/反硝化菌（單菌驗(yàn)證）培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:25℃

anti- GFP tag antibody資源名稱拉布倫茨氏菌種屬:Labrenzia│sp.分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自多環(huán)芳烴(PAHs)富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃

anti- GFPT1 antibody資源名稱賴氨酸芽孢桿菌種屬:Lysinibacillus│macroides分離基物:沉積物/深海沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:4-20℃

anti- GFPT2 antibody資源名稱黑美人弧菌種屬:Vibrio│nigripulchritudo分離基物:水樣/海水提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:；產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)胞外酶有明膠酶(gelatinase)、脂肪酶(Lipase)、幾丁質(zhì)酶、淀粉酶，不降解海藻酸鈉(alginate)；生物轉(zhuǎn)化微生物/能夠積累聚beta羥丁酸（PHB）培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GFRA2 antibody資源名稱潮汐粘著桿菌種屬:Tenacibaculum│aestuarii分離基物:沉積物/潮灘沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GFRA2 antibody資源名稱哈夫尼希瓦氏菌種屬:Shewanella│hafniensis分離基物:生物樣/黃翅魚腸體內(nèi)容物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/黃翅魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶（三丁酸甘油酯）、蛋白酶、脂酶（Tween80）培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:28℃

anti- GFRA3 antibody資源名稱克里布所雷夫松氏細(xì)菌種屬:Leifsonia│kribbensis分離基物:土壤/椰子樹腐爛芯覆土提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33

anti- GGA1 antibody資源名稱泛酸枝芽孢桿菌種屬:Virgibacillus│pantothenticus分離基物:土壤/花園土壤提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471

anti- GGA2 antibody資源名稱綠島海桿菌種屬:Marinobacter│lutaoensis分離基物:沉積物/碳酸巖沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:高溫菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:57℃
轉(zhuǎn)基因品系玉米DBT418 PCR試劑盒大鼠epidemic hemorrhagic fever IgG antibody Human CFP(Properdin) ELISA Kit0.938ng/ml1.563-100ng/ml

大鼠 PI Ab-IgG/IgM Human BGN(Biglycan) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

大鼠 PL-A2 Human GAL(Galanin peptides) ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml

大鼠 PCK Human SERP1(Stress-associated endoplasmic reticulum protein 1) ELISA Kit18.75pg/ml31.25-2000pg/ml

大鼠 PAG Human SERPIND1 ELISA Kit9.375pg/ml15.625-1000pg/ml

大鼠 PI3K Human BIRC2(Baculoviral IAP repeat-containing protein 2) ELISA Kit46.9pg/ml78-5000pg/ml

大鼠 pACCase Human HYAL4(Hyaluronidase-4) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml