實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。
3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系玉米B16 PCR試劑盒
貨號:CP97264
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
運(yùn)輸：低溫
注意事項(xiàng)：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時(shí)間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué)；8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

PCR檢測方法包括以下步驟：
(1)將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
(2)待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中步驟(1)為：將參照基因與待測目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測目的基因擴(kuò)增檢測的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測的可靠性。
步驟(2)為：待測樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對定量檢測結(jié)果。
其中所述待測目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品，則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取，多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個(gè)用于PCR 陽性對照。

以下是轉(zhuǎn)基因品系玉米B16 PCR試劑盒公司正在熱銷的產(chǎn)品：
anti- FER antibody資源名稱鏈球菌(不定種)種屬:Streptococcus│sp.分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396

anti- FERMT1 antibody資源名稱傳染性支氣管炎病毒種屬:Coronavirus│Infectious bronchitis virus分離基物:病雞提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0

anti- FERMT3 antibody資源名稱禽腦脊髓炎病毒種屬:Enterovirus│Avian encephalomyetitis virus分離基物:病雞提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0

anti- Ferritin antibody 資源名稱大腸埃希菌種屬:Escherichia│coli分離基物:病料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:335

anti- Ferritin light chain antibody資源名稱牛瘟病毒種屬:Morbillivirus│Rinderpest virus分離基物:病牛提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0

anti- FES antibody資源名稱兔出血癥病毒種屬:Lagovirus│Rabbit hemorrhagic disease virus分離基物:病兔提供形式:凍干物安全等級:3模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:0

anti- Fetuin-A antibody資源名稱單核細(xì)胞增生李斯特菌種屬:Listeria│monocytogenes分離基物:青貯料提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:研究培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:396

anti- Fetuin-A antibody資源名稱DH5α大腸桿菌克隆菌株種屬:DH5α Strain安全等級:1模式菌株:未知應(yīng)用領(lǐng)域:基本應(yīng)用：用于基因克隆 基因型： F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB傳代方法質(zhì)粒轉(zhuǎn)化：42℃熱激生長條件:培養(yǎng)條件：37℃，有氧，LB

anti- fetuin-B antibody資源名稱灰葡萄孢（斜面）種屬:Botrytis cinerea分離基物:草莓提供形式:試管斜面安全等級:1模式菌株:未知應(yīng)用領(lǐng)域:用于生產(chǎn)脫落酸。培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾水中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。

anti- FEV antibody資源名稱氧化亞鐵酸硫桿狀菌（不提供）種屬:Acidithiobacillus ferrooxidans分離基物:酸性的瀝青樣的煤炭礦流出物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:DSM 882 LEPTOSPIRILLUM (HH) MEDIUM:溶液A： (NH4)2SO4 132.0 mg MgCl2·6 H2O 53.0 mg KH2PO4 27.0 mg CaCl2·2 H2O 147.01 mg 蒸餾水 950.0 ml 用10N H2SO4 調(diào)節(jié)pH 至 1.8。 溶液B： FeSO4 · 7 H2O 20.0 g H2SO4 0.25 N 50.0 ml pH 1.2 微量元素溶液： MnCl2 · 2 H2O 62.0 mg ZnCl2 68.0 mg CoCl2· 6 H2O 64.0 mg H3BO3 31.0 mg Na2MoO4 10.0 mg CuCl2· 2 H2O 67.0 mg 蒸餾水 1.0 L 用10N H2SO4調(diào)節(jié) pH 至1.8 上述溶液分別在121℃，滅菌 15 min。臨用前將A液和B液混合并加入1ml 微量元素溶液。調(diào)節(jié)pH 至1.8。

anti- FGA antibody資源名稱中間普氏菌種屬:Prevotella intermedia分離基物:膿胸安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:TSA＋5%脫纖維羊血：胰蛋白胨(酪蛋白胰酶消化物) 15.0g，大豆蛋白胨(大豆粉木瓜蛋白酶消化物) 5.0g， 5.0g，瓊脂 15.0g，pH7.3±0.2。121℃，15min。滅菌后無菌條件添加5%脫纖維羊血。生長條件:37℃，嚴(yán)格厭氧。

anti- FGB antibody資源名稱特基拉芽孢桿菌種屬:Bacillus tequilensis分離基物:印染廢水；采集地│第二印染廠提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基:酵母提取物5.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 10.0g，瓊脂15.0g，蒸餾1.0L，pH 7.0。生長條件:30℃，好氧

anti- FGD3 antibody資源名稱假小鏈雙歧桿菌種屬:Bifidobacterium pseudocatenulatum分離基物:feces of infant提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:改良MRS培養(yǎng)基:MRS培養(yǎng)基:+0.5%L-半胱氨酸（MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g，牛肉粉 8.0g，酵母粉 4.0 g，葡萄糖 20.0 g，硫酸鎂 0.2 g，乙酸鈉 5.0 g，檸檬酸三銨 2.0 g，磷酸氫二鉀 2.0 g，硫酸錳 0.05 g，吐溫80 1.0 g，蒸餾水 1000mL。pH6.2±0.2。121℃，15min。）

anti- FGD5 antibody資源名稱產(chǎn)乙酸嗜蛋白質(zhì)菌種屬:Proteiniphilum│acetatigenes分離基物:顆粒污泥提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:942

anti- FGF1 antibody資源名稱加德納菌種屬:Gardnerella│vaginalis提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:865生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法

anti- FGF12 antibody資源名稱中華靈芝 (紫芝)（斜面）種屬:Ganoderma sinense分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:靈芝多糖培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:綜合PDA瓊脂：馬鈴薯提取液1.0L ，葡萄糖20.0g ，KH2PO4 3.0g ，MgSO4·7H2O 1.5g ，維生素B1微量，瓊脂15.0g ，pH 6.0

anti- FGF12 antibody資源名稱星狀諾卡氏菌種屬:Nocardia asteroides提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:葡萄糖、天門冬素瓊脂培養(yǎng)基:葡萄糖 10.0 g,天門冬素 0.5 g,K2HPO4 0.5 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.2-7.4。121℃，15min。生長條件:28℃，好氧

anti- FGF13 antibody資源名稱葡糖桿菌種屬:Gluconobacter sp.提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Produces 2-keto-L-gulonic acid from sorbitol (U.S.培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:醋酸菌培養(yǎng)基:葡萄糖100.0g，酵母提取物 10.0 g，CaCO3 20.0g， 瓊脂 15.0 g，蒸餾水1.0 L， pH 6.8生長條件:26℃，好氧
轉(zhuǎn)基因品系玉米B16 PCR試劑盒大鼠Nephrin Human CYP11A1(Cholesterol side-chain cleavage enzyme, mitochondrial) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 NT-4 Human TNMD(Tenomodulin) ELISA Kit0.188ng/ml0.312-20ng/ml

大鼠 NT-3 Human PGAP1(Post-GPI attachment to proteins factor 1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 NTRK1 Human LPAR3(Lysophosphatidic acid receptor 3) ELISA Kit0.469ng/ml0.78-50ng/ml

大鼠 nNOS/ Human PGM1(Phosphoglucomutase-1) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml

大鼠 NSE Human UBE2A(Ubiquitin-conjugating enzyme E2 A) ELISA Kit0.188ng/ml0.313-20ng/ml

大鼠 NPY Human PHD2(Prolyl hydroxylase domain-containing protein 2) ELISA Kit0.094ng/ml0.156-10ng/ml