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非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2操作步驟

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更新時間:2017-05-29 10:56:53瀏覽次數(shù):390次

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非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2操作步驟現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

細胞名稱     非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2操作步驟
形態(tài)特性      上皮樣細胞
生長特性     貼壁生長
特征特性      Vero-HCV-E2細胞整合有丙型肝炎病毒的E2基因,能穩(wěn)定表達E2蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學病毒學國家重點實驗室郭佳博士于2008年構(gòu)建并保存。 
培養(yǎng)條件      DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
傳代方法      1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況     C40
凍存條件      基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測     陰性
STR     
同工酶     同工酶鑒定
染色體     
使用權(quán)限     A類
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2操作步驟細胞培養(yǎng)
1、冷凍管應(yīng)如何解凍?
取出冷凍管后, 須立即放入37 ℃水槽中快速解凍, 輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化, 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿, 否則易發(fā)生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時, 必須注意安全, 預防冷凍管之爆裂。
2、細胞冷凍管解凍培養(yǎng)時, 是否應(yīng)馬上去除DMSO?
除少數(shù)特別注明對DMSO 敏感之細胞外, 絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞), 在解凍之后, 應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中, 待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之問題。
3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?
不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細胞大都無法立即適應(yīng), 造成細胞無法存活。
4、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?
不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源, 所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2操作步驟復蘇操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細胞能盡快通過Z易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
公司細胞庫細胞株種類齊全:大鼠腹水癌細胞、腫瘤細胞、正常細胞、耐藥細胞株,如:人滑膜細胞,人胃癌細胞,人細胞,人腎近曲小管上皮細胞,肝癌細胞,心肌細胞,子宮內(nèi)膜細胞等。細胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導,另有細胞培養(yǎng)類產(chǎn)品胎牛血清、小牛血清、DMSO、雙抗、胰酶、DMEM、1640培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)瓶等產(chǎn)品。歡迎廣大科研用戶
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lung, kidney and skeletal muscle. Not detectable in liver.
Post-translational modifications : Dually phosphorylated on Thr-219 and Tyr-221, which activates the enzyme. Autophosphorylated in vitro on threonine and tyrosine residues when the C-terminal part of the kinase, which could have a regulatory role, is absent.
Similarity : Belongs to the protein kinase superfamily. CMGC Ser/Thr protein kinase family. MAP kinase subfamily.
Contains 1 protein kinase domain.
Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q13164.2
英文名稱  Anti-ERK4 
中文名稱  細胞外信號調(diào)節(jié)激酶4抗體 
別    名  ERK-4; ERK3; Erk3 related; ERK4; Extracellular signal regulated kinase 4; Extracellular signal-regulated kinase 4; MAP kinase 4; MAP kinase isoform p63; MAPK 4; MAPK4; Mitogen activated protein kinase 4; Mitogen-activated protein kinase 4; MK04_HUMAN; p63 MAPK; p63-MAPK; p63MAPK; PRKM4. 
濃    度  1mg/1ml 
非洲綠猴腎細胞系/HCV-E2;Vero-HCV-E2操作步驟規(guī) 格  0.1ml/100μg  0.2ml/200μg     
抗體來源  Rabbit  
克隆類型  polyclonal 
交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
產(chǎn)品類型  一抗    
研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學 信號轉(zhuǎn)導 激酶和磷酸酶  

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