国产精品成人网站,日韩视频二区,亚洲成人手机电影,怡红院国产

上海莼試生物技術有限公司
初級會員 | 第9年

13585831301

如何選擇原代細胞培養(yǎng)的冷凍保護劑?

時間:2017/9/21閱讀:219
分享:

原代細胞冷凍保護劑是指可以保護細胞免受冷凍損傷的物質。冷凍保護劑常常配制成一定的溶液。一般來講,只有紅細胞、大多數(shù)微生物和極少數(shù)有核的哺乳動物細胞懸浮在不加冷凍保護劑的水或簡單的鹽溶液中,并以Z適的冷凍速率冷凍,可以獲得活的凍存物。
但對于大多數(shù)有核哺乳動物細胞來說,在不加冷凍保護劑的情況下,無Z適冷凍速率可言,也不能獲得活的冷凍物。例如將小鼠骨髓細胞懸浮在不加冷凍保護劑的平衡鹽溶液中,并以0.3~600℃/min 的冷凍速率降溫冷凍,98% 以上的細胞會死亡;而加入甘油冷凍保護劑進行冷凍保存時,98% 以上的細胞都可存活。
冷凍保護劑可分為滲透性和非滲透性兩類。
01class
滲透性冷凍保護劑
滲透性冷凍保護劑可以滲透到細胞內,一般是一些小分子物質,主要包括甘油、DMSO、乙二醇、丙二醇、乙酰胺、甲醇等。其保護機制是在細胞冷凍懸液*凝固之前,滲透到細胞內,在細胞內外產生一定的摩爾濃度,降低細胞內外未結冰溶液中電解質的濃度,從而保護細胞免受高濃度電解質的損傷,同時,細胞內水分也不會過分外滲,避免了細胞過分脫水皺縮。
甘油和DMSO并不防止細胞內結冰,在使用該類冷凍保護劑時,需要一定的時間進行預冷,讓甘油或DMSO等成分滲透到細胞內,在細胞內外達到平衡以起到充分的保護作用。
目前DMSO的應用比甘油更為廣泛,但要注意的是,DMSO在常溫下對細胞的毒性作用較大,而在4℃時,其毒性作用大大減弱,且仍能以較快的速度滲透到細胞內。所以,凍存時DMSO平衡多在4℃下進行,一般需要40~60分鐘。
02class
非滲透性冷凍保護劑
非滲透性冷凍保護劑不能滲透到細胞內,一般是些大分子物質,主要包括聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、蔗糖、聚乙二醇、葡聚糖、白蛋白以及羥乙基淀粉等。原代細胞其保護機制的假說很多,其中有一種可能是,聚乙烯吡咯烷酮等大分子物質可以優(yōu)先同溶液中水分子結合,降低溶液中自由水的含量,使冰點降低,減少冰晶的形成;同時,由于其分子量大,使溶液中電解質濃度降低,從而減輕溶質損傷。
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-Bdkrb2/B2R/FITC  熒光素標記緩激肽B2受體抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-Bdkrb2/B2R/FITC  熒光素標記緩激肽B2受體抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-BDNF  腦源神經營養(yǎng)因子抗體     0.1ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-BDNF/FITC  熒光素標記BDNF蛋白抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-BDNF/FITC  熒光素標記BDNF蛋白抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-BECN1  BECLIN-1抗體     0.1ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-BECN1/FITC  熒光素標記一種抑癌基因抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-BECN1/FITC  熒光素標記一種抑癌基因抗體IgG     0.2ml
規(guī)格:    Multi-class antibodies    Anti-beta Adaptin/AP2  銜接蛋白β抗體     0.2ml
原代細胞

 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言