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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第10年

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實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞爬片的免疫熒光操作步驟

時(shí)間:2017/6/13閱讀:1905
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1.取出ATCC細(xì)胞爬片放到35mm或60mm用過(guò)的細(xì)胞培養(yǎng)皿里,PBS洗三遍。
 注意:有的時(shí)候作的細(xì)胞爬片可能比較小,因此夾取的時(shí)候要小心,注意 反正面,放在皿里洗比較方便,避免了來(lái)回夾取,另外洗的時(shí)候加PBS不要太沖,不要細(xì)胞沖下來(lái)。洗的時(shí)候我都是多加PBS,稍晃一下就倒掉,沒(méi)有等5分鐘或10分鐘。
2. 4%冷的多聚甲醛固定20分鐘,PBS洗三遍。
3. 0.2%Triton X-100通透10分鐘,PBS洗三遍。
4. 與二抗相同宿主的血清封閉30分鐘,PBS洗三遍。
5. 一抗4度濕盒內(nèi)過(guò)夜,也可37度2小時(shí),感覺(jué)前者效果好,PBS洗三遍。
6.二抗室溫2小時(shí)(避光),或者37度1半小時(shí),PBS洗三遍。
7.用DAPI染核,然后直接照熒光片。
8.蒸餾水洗掉PBS,甘油封片,指甲油封片子的四周,因?yàn)楦视筒幌髽?shù)脂那樣會(huì)干,所以不用指甲油封的話會(huì)弄的一塌糊涂。
人成纖維細(xì)胞-新生兒cDNA    英文名稱:    HDF-n cDNA    ATCC細(xì)胞規(guī)格:    20 reactions        
人成纖維細(xì)胞-成人cDNA    英文名稱:    HDF-a cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人生發(fā)基質(zhì)細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HHGMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
      
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HLEC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人淋巴成纖維細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HLF cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人口腔角質(zhì)細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HOK cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人牙齦成纖維細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HGF cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人牙周膜成纖維細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HPLF cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人食道上皮細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HEEpiC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人食道平滑肌細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HESMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HIMEC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人腸平滑肌細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HISMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HCSMC cDNA    規(guī)格:    20 reactions        
人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA    英文名稱:    HPMEC cDNA    規(guī)格:    20 reactions ATCC細(xì)胞       

 

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