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國產(chǎn)貨號 | GOY-01S6611 |
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6611 |
商品介紹
測定意義 GAPDH催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸,是糖酵解途徑的關鍵酶,與糖異生途徑、體內血糖濃度的維持和糖尿病的發(fā)生密切相關,在機體糖、脂、蛋白代謝紊亂疾病中發(fā)揮重要作用。 測定原理 3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、無機磷和NAD,340nm處測定NADH的減少量可反映GADPH活性的高低。 需自備的儀器和用品 分光光度計、恒溫水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
焦性沒食子酸 AR,98%氧化銠,水合 銠 55%Anti-LIF 白血病抑制因子抗體
焦性沒食子酸 >99.0%(GC)四氯鈀酸鈉 98%Anti-LIFR/CD118 白血病抑制因子受體抗體
沒食子酸酯 98%碳酸銀 CP,98.0%Anti-Lingo-1 Nogo受體反應蛋白抗體
3,4,5-氧基苯甲酸 99%氯金酸鈉 金含量,48% Anti-LIMK1 單蛋白激1抗體
2,3,4-三羥基苯甲 98%銀 銀含量, 77.0 % Anti-Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505) 化單蛋白激1/2抗體
2,3,4-氧基苯甲 98%四(三苯基膦)鈀(0) 99.8% metals basis, Pd 9.0%Anti-LIR-6 白球蛋白樣受體6抗體
1,2,3-氧基苯 98%間氯 CP,98%Anti-LIR-8/CD85c/LILRB5 白球蛋白樣受體8抗體
2,3,4-氧基苯甲酸 97%間氯 GCS,>99.5%(GC)Anti-LIS1 無腦回的致病基因LIS1抗體
3磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)微量法檢測試劑盒2-溴酰溴 97%環(huán)指蛋白138抗體
粘 99%Nogo66受體相關蛋白3抗體
酰溴 95%Ras相關區(qū)域家族1A抗體
皂土(膨潤土) Bentone SD-1,適于中至低性溶劑Rh血型C抗原抗體
皂土(膨潤土) Bentone SD-2,適于中高性溶劑RAS家族關聯(lián)結構域蛋白6抗體
BENTONE 27,應用在中等到高等性溶劑Ras樣蛋白A抗體
皂土(膨潤土) BENTONE 38,應用在性溶劑體系中衰老標記蛋白30抗體
鋅粒 99.99% metals basis環(huán)指蛋白56
二二硒 99%受體活性修飾蛋白1抗體
99%胞內接頭蛋白P14抗體
鹽鹽 ≥99.0% (HPLC)RNA結合蛋白X-連鎖蛋白2抗體
6-硫 98%視網(wǎng)膜母瘤相關蛋白p130抗體
0.98化A-Raf抗體
≥99.5% (HPLC)環(huán)指蛋白10抗體
分析標準品,≥99%(HPLC)RAN結合蛋白2/核孔蛋白抗體
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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