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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>糖酵解系列>> 3磷酸甘油酸激酶(PGK)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6615 |
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商品介紹
測(cè)定意義 3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),催化1,3-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>3-磷酸甘油酸,產(chǎn)生1分子ATP,具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能,廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。 測(cè)定原理 3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6615 |
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
少突膠質(zhì)轉(zhuǎn)錄因子3抗體Anti-ABI1 Antibody小鼠白介素16elisa檢測(cè)試劑盒品牌
螺旋轉(zhuǎn)錄因子OTP抗體Anti-ABCG8 Antibody小鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4elisa檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏膜通道蛋白抗體Anti-ABI1 Antibody(原貨號(hào)PB0459)小鼠基質(zhì)金屬蛋白1elisa檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)
緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體Anti-ABL1 Antibody小鼠球蛋白Melisa檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
富含脯突觸相關(guān)蛋白SHANK3抗體Anti-ABI2 Antibody小鼠可溶性P選擇素elisa檢測(cè)試劑盒多少錢(qián)
癌調(diào)蛋白/癌鈣蛋白抗體Anti-ABL2 Antibody大鼠血管緊張素Ⅰelisa檢測(cè)試劑盒品牌
少突髓磷脂糖蛋白抗體Anti-ABL2 Antibody(原貨號(hào)PB0959)大鼠糖皮質(zhì)類(lèi)固醇受體elisa檢測(cè)試劑盒品牌
樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/粘附分子樣蛋白抗體Anti-ABR Antibody小鼠乙型肝炎表面抗體elisa檢測(cè)試劑盒
3磷酸甘油酸激酶(PGK)微量法檢測(cè)試劑盒Celite 硅藻土,洗 用于總膳食纖維含量分析, TDF-100A小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)免疫試劑盒自噬相關(guān)蛋白4D抗體TP53TG3 p53靶蛋白3抗體
助濾劑,洗,碳鈉處理,通量煅燒小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)免疫試劑盒自噬相關(guān)蛋白9A抗體TP53I8/EI24 腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白8
助濾劑,通量煅燒(filter aid, flux calcined)小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)免疫試劑盒縮C抗體TP53I13 腫瘤蛋白p53誘導(dǎo)蛋白13(腫瘤抑制因)
1-癸烯 95%小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D(VEGF-D)免疫試劑盒谷草轉(zhuǎn)氨抗體TP53I11 腫瘤蛋白P53誘導(dǎo)蛋白11抗體
二正辛 97%小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C(VEGF-C)免疫試劑盒三腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體TP/thymidine phosphorylase 胸苷化抗體
1-己烯 99%小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子B(VEGF-B)免疫試劑盒三腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體Torc2/Crtc2 CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體
1-己烯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5% (GC)小鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)免疫試劑盒酰輔A脫氫長(zhǎng)鏈抗體TORC1/CRTC1 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體
1-己烯 97%小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化2(ACE2)免疫試劑盒酰輔A脫氫中鏈抗體TOPO II/TOPO II Alpha DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體
1-己烯 Standard for GC小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化(ACE)免疫試劑盒酰輔A脫氫短鏈抗體TOP2 alpha DNA拓普西異構(gòu)ⅡA抗體
α-乙烯 99%小鼠血管緊張素原(aGT)免疫試劑盒過(guò)氧化物酰輔A氧化1抗體 線(xiàn)粒體DNA拓普西異構(gòu)Ⅰ抗體
1-辛烯 98%小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Tomoregulin-1 腦腫瘤抑癌蛋白1抗體
2,4,4--1-戊烯 98%小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)免疫試劑盒轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱氨和絲氨富含核蛋白1)TNR/Tenascin-R 腱糖蛋白R(shí)抗體
2,3-二-1,4-萘醌 98%小鼠血管緊張素1-7(Ang1-7)免疫試劑盒有絲分裂激A/B/C抗體TNNI3K 絲氨/蘇氨蛋白激TNN13K抗體
2,3-二-1,4-萘醌 分析標(biāo)準(zhǔn)品小鼠血管活性腸肽(VIP)免疫試劑盒蛋白酪氨激ATK抗體TNMD/tenomodulin 腱調(diào)蛋白抗體(軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白)
對(duì)氨 98%小鼠雄烯二酮(ASD)免疫試劑盒長(zhǎng)鏈脂肪輔A連接1/2抗體TNK1 非受體型酪氨蛋白激Tnk1抗體
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