當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖酵解系列>> 葡萄糖6磷酸(6PG)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6621 |
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商品介紹
測定意義 6PG (Glucose-6-phosphate,葡萄糖-6-磷酸,又稱6-磷酸葡萄糖),是糖酵解和磷酸戊糖途徑的中間產(chǎn)物,廣泛存在于動植物體和微生物中。在糖酵解的第一步反應(yīng)中,葡萄糖被己糖激酶催化生成葡萄糖-6-磷酸,然后通過磷酸葡萄糖異構(gòu)酶的催化形成果糖-6-磷酸,以繼續(xù)糖酵解的其它步驟;而在戊糖磷酸途徑中,葡萄糖-6-磷酸是其第一個底物,該過程也是生成NADPH的主要途徑。此外,葡萄糖-6-磷酸也能轉(zhuǎn)化形成糖原或淀粉而被儲存起來。 測定原理: 6-磷酸葡萄糖脫氫酶可催化6PG和NADP+生成6磷酸葡萄糖酸和NADPH,NADPH在1-mPMS的作用下使WST-8顯橙黃色,在450 nm下測定吸光值。 需自備的儀器和用品: 分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6621 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
測定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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聚乙烯(PS) 擠出級小鼠Ⅱ(FⅡ)免疫試劑盒化腺瘤樣息肉抗體TAAL6/Transmembrane 4 L6 family member 1 腫瘤相關(guān)抗原L6抗體
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2,5-二噁唑 99%, 閃爍級小鼠原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒周期后期促進(jìn)蛋白亞10抗體T7 tag T7 tag標(biāo)簽抗體
異磺酰酯 98%小鼠受體(TR)免疫試劑盒周期后期促進(jìn)蛋白亞11抗體T4/L-Thyroxine 狀腺素T4抗體
3,4-二氧 98%小鼠抗復(fù)合物(TAT)免疫試劑盒腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體T4/L-Thyroxine 狀腺素T4抗體
3,4-二氧 ≥98%, FG小鼠凝溶膠蛋白(Gelsolin)免疫試劑盒化分裂周期蛋白16抗體T3 狀腺素T3抗體
愈創(chuàng)木酚 CP,98.0%小鼠尿微量白蛋白(ALB)免疫試劑盒DNA修復(fù)相互作用蛋白抗體T3 狀腺素T3抗體
球型四氧化三鐵磁粉 100-300nm小鼠尿嘧核苷化1(UPP1)免疫試劑盒脂肪膜相關(guān)蛋白抗體T2R38/TAS2R38 味覺感受器蛋白T2R38抗體
鄰二 ≥99%小鼠尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒載脂蛋白A1結(jié)合蛋白抗體抗體T Beta 10 β10抗體
乙酰 AR,98.5%小鼠尿激型纖溶原激活物(uPA)免疫試劑盒載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物1抗體SYVN1 滑膜凋亡抑制物1抗體
乙酰 CP,98.0%小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)免疫試劑盒載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物2抗體SYTL5/slp5 突觸樣蛋白5亞型2抗體
乙酰 99%,無色小鼠腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)免疫試劑盒載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3B抗體SYT3 突觸結(jié)合蛋白3抗體
正丁酰 98%小鼠腦脊髓炎病(EV)抗體(IgG)免疫試劑盒載脂蛋白B-mRNA編輯復(fù)合物3C抗體SYP p38/Synaptophysin/SAP-1 突觸素抗體/突觸相關(guān)蛋白-1
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