選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟(jì)性全面評價(jià)。
產(chǎn)品名稱：羊促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)elisa試劑盒
英文名稱：Sheep Corticoliberin,CRH ELISA kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）；-20℃（長時(shí)間不用時(shí)）。
有效期： 6 個(gè)月(4℃)；12 個(gè)月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液
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具有如下優(yōu)點(diǎn)：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型；
五、性價(jià)比非常好，節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項(xiàng)：
1加樣：
①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
苊（標(biāo)準(zhǔn)品）Spry2 (D3G1A) Rabbit mAb(三氟甲基)(基)硫脲

鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液（1000μg/ml,介質(zhì):1.0 mol/L HNO3）Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)異-2,二羥-1,雙二基膦丁烷

鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液（100µg/mL,基體:5%HCl）p95/NBS1 (D6J5I) Rabbit mAb基己基三酮

甲（標(biāo)準(zhǔn)品）HCN2 (D1C6I) Rabbit mAb芐氧基酸

鄰二甲酸二丁氧基酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb7-氟吲哚

三聚酸（標(biāo)準(zhǔn)品）CGRP (D5R8F) Rabbit mAb2,二甲基-吡啶-N-氧化物

(+/-)-兒茶精（標(biāo)準(zhǔn)品）CGRP (D5R8F) Rabbit mAb硝基肉桂

鄰二甲酸二庚酯（標(biāo)準(zhǔn)品）EphB4 (D1C7N) Rabbit mAb2--氨基吡啶

反油酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb甲基糠基二硫

十七碳酸（標(biāo)準(zhǔn)品）Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb氨基-溴吡啶

十七碳酸（98%）PROX1 (D2J6J) Rabbit mAb酯

隱色孔雀石綠（標(biāo)準(zhǔn)品）Phospho-CDCP1 (Tyr743) (D2G2J) Rabbit mAb6-溴-氮雜吲哚

二十酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）VPRBP (D5K5V) Rabbit mAb2-氨基-基噻吩-羧酸酯

蓖麻油酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）α-Smooth Muscle Actin Antibody環(huán)戊基酸

甲酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）CXCL10 (D5L5L) Rabbit mAb2,二酸

亞硫酸氫鈉甲萘醌（標(biāo)準(zhǔn)品）IFI16 (D8B5T) Rabbit mAb氧基-叔丁基-二甲基硅烷

山崳酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）TIM-1 (E1R9N) Rabbit mAb-2-硝

己酸甲酯（標(biāo)準(zhǔn)品）β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb一二氟酮
羊促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)elisa試劑盒甲酸丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)細(xì)胞外基質(zhì)磷酸化抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒1-己炔-3- 96%磷脂酰絲氨酸馬來酸二丁酯 97%肥大細(xì)胞蛋白酶7抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體DNA萃取試劑盒6-羥基喹啉 98%T7 DNA聚合酶馬來酸二丁酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)微管相關(guān)蛋白4抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體粗提分離試劑盒氫化奎寧定 96%2′-脫氧胞苷-5′-三磷酸四鈉鹽馬來酸二乙酯 96%26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型7抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離（粗提）試劑盒氫化奎寧 95%乙二胺四乙酸二鈉鈣鹽富馬酸二甲酯 97%蛋白酪氨酸磷酸酶非受體型4抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離（高純）試劑盒1,6-庚二炔 91%4-硝基甲酸富馬酸二甲酯 99%腦腸肽O?；D(zhuǎn)移酶抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離（活性）試劑盒4-羥基吡啶 97%無水硫酸鈉己二酸二乙酯 CP,99.0%轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子MRG15抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒1-己炔 97%甲基丁香酚己二酸二乙酯 AR,99.5%髓系/淋巴混合譜系白血病蛋白5抗體真菌/酵母細(xì)胞線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒2-羥基-5-甲基吡啶 97%冬凌草甲素
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。