當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 賴氨酸(LYS)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6538 |
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商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6538 |
商品介紹:
測定意義
賴氨酸是人體必需氨基酸之一,能促進(jìn)人體發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能,并有提高中樞神經(jīng)組織功能的作用。賴氨酸為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低,且在加工過程中易被破壞而缺乏,故稱為第一限制性氨基酸。
測定原理:
蛋白質(zhì)中的賴氨酸具有一個游離的ε-NH2,它與茚三酮試劑反應(yīng)生成藍(lán)紫色物質(zhì),其顏色的深淺在一定范圍內(nèi)與賴氨酸的含量成線性關(guān)系。與賴氨酸的碳原子數(shù)目相同,而且僅有—個游離氨基(ε-NH2),所以通常用配制標(biāo)準(zhǔn)液。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水、水浴鍋。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
小鼠孕酮受體Anti-MTOR Antibody人角蛋白10(KRT10)elisa定量檢測試劑盒
兔子髓質(zhì)素Anti-MUTYH Antibody人S轉(zhuǎn)移μ2(GSTμ2/GSTm2)elisa定量檢測試劑盒
大鼠D-乳酸脫氫Anti-MYB Antibody人唾液酸(SA)elisa定量檢測試劑盒
人可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2Anti-MX2 Antibody人胃蛋白原A(PGA)elisa定量檢測試劑盒
人胸腺基質(zhì)生成素Anti-MYB-A Antibody人纖維母表面抗原(FSP)elisa定量檢測試劑盒
大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子Anti-MYBPC1 Antibody人線粒體肌酸激1B(CKMT1B)elisa定量檢測試劑盒
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6Anti-MYBPC1 Antibody人胸腺表達(dá)趨化因子(TECK/CCL25)elisa定量檢測試劑盒
雙花扁豆凝集素Anti-MYF5 Antibody人脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)elisa定量檢測試劑盒
賴氨酸(LYS)微量法檢測試劑盒二二硅烷 色譜固定液Anti-BMP8/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體IgG大鼠軸蛋白抑制蛋白2(AXIN2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二二硅烷 >98.5%(GC)Anti-BMPR-1A/FITC 熒光素標(biāo)記骨成型蛋白受體1A抗體IgG大鼠成纖維生長因子4(FGF4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二二硅烷 CP,96.0%Anti-BNP/FITC 熒光素標(biāo)記腦鈉素抗體IgG大鼠成纖維生長因子6(FGF6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二硅烷 99%Anti-BNP/FITC 熒光素標(biāo)記腦鈉素抗體IgG大鼠成纖維生長因子9(FGF9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三硅烷 99%Anti-BRN3A /FITC 熒光素標(biāo)記轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體IgG大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF/FGF2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三硅烷 99%Anti-BOb-1/FITC 熒光素標(biāo)記B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG大鼠B活化因子受體(BAFFR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雄烯二酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%Anti-BRAF/FITC 熒光素標(biāo)記黑素瘤相關(guān)蛋白抗體IgG大鼠B淋巴瘤因子10(BCL-10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
二乙酰 98%Anti-B Raf(phospho S365) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化B-Raf抗體IgG大鼠B淋巴瘤因子3(BCL-3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三乙酰 98%Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC 熒光素標(biāo)記化B-Raf抗體IgG大鼠B淋巴瘤因子2(BCL-2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
L-溶液 60%水溶液Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 熒光素標(biāo)記化B-Raf抗體IgG大鼠BCL-2拮抗劑/殺手1(BAK1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三偏鈉 95%Anti-BRCA1(human)/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感因1抗體(人)IgG大鼠BCL-2相關(guān)X蛋白(BAX)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
乙烯三乙氧硅烷 97%Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感因1抗體(小鼠 大鼠)IgG大鼠BCL-2修飾因子(BMF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檸檬鐵銨 ARAnti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化癌易感因1抗體IgG大鼠BCL-2相關(guān)死亡促進(jìn)因子(BAD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檸檬氫二銨 AR,99%Anti-BRCA2/FITC 熒光素標(biāo)記癌易感因2抗體IgG大鼠β素(BTC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
檸檬氫二銨 CP,98%Anti-BrdU/FITC(Bromodeoxyuridine) 熒光素標(biāo)記兔抗溴脫氧尿苷抗體IgG大鼠β位淀粉樣前體蛋白裂解1(BACE1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
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