當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氨基酸代謝系列>> 酸性磷酸酶(ACP)微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6542 |
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操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/48樣 |
檢測方法 | 微量法 |
貨號 | GOY-01S6542 |
商品介紹:
測定意義
ACP在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸,常見于巨噬細胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。
測定原理:
在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成,與4-氨基安替和反應生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收;通過測定510nm吸光度增加速率,來計算ACP活性。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96孔板、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。
實驗方法學:
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
人抗BP180抗體Anti-SEMA4D Antibody干擾素誘導蛋白10檢測試劑盒
大鼠間粘附分子3Anti-SENP1 Antibody干擾素誘導蛋白10檢測試劑盒
大鼠纖溶原激活物抑制因子1Anti-SENP2 Antibody干擾素誘導蛋白4檢測試劑盒
人抗BB抗體Anti-SENP7 Antibody干因子檢測試劑盒
小鼠皮質(zhì)Anti-SENP7 Antibody干因子受體檢測試劑盒
人抗平滑肌抗體Anti-SENP3 Antibody高爾基體蛋白73檢測試劑盒
小鼠促甲狀腺素Anti-SENP5 Antibody高密度脂蛋白檢測試劑盒
大鼠纖溶原激活物抑制因子Anti-SEPHS1 Antibody高密度脂蛋白膽固檢測試劑盒
酸性磷酸酶(ACP)微量法檢測試劑盒壬酚 GR大鼠間粘附分子2(ICAM-2)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)膽汁受體1IRF4 干擾素調(diào)節(jié)因子4抗體
1,5-戊二 97%大鼠間粘附分子1(ICAM-1)免疫試劑盒葡萄糖6-脫氨1抗體IRF3 干擾素調(diào)節(jié)因子3
CP,≥99% (GC) 大鼠分裂周期因(CDC)免疫試劑盒葡萄糖6-脫氨2抗體IRF-1/MAR1 干擾素調(diào)節(jié)因子1抗體
炔 99%(劇品)大鼠性T淋巴相關抗原4(CTLA-4/CD152)免疫試劑盒葡萄糖6-N-乙酰轉(zhuǎn)移1抗體IRAK4 白介素-1受體相關激4抗體
≥97% (HPLC)大鼠凋亡調(diào)節(jié)因子BAX(BAX)免疫試劑盒谷氨酰1抗體IRAK2 白介素-1受體相關激2抗體
三化鉻(III) 六水合物 CP,98%大鼠硒蛋白P(SEPP1)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體IRAK1 白介素-1受體相關激1抗體
化鋇,二水 AR,99.5%大鼠戊糖素(Pentosidine)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體IQGAP1 支架蛋白抗體
化鋇,二水 99.99% metals basis大鼠五聚素3(PTX3)免疫試劑盒G蛋白通路抑制物蛋白2抗體IQCK IQCK蛋白抗體
氫氧化鋇,八水 CP,97%大鼠胃泌調(diào)節(jié)素免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體GPR177蛋白抗體IQCJ IQCJ蛋白抗體
氟化鈣 CP,98.0%大鼠胃泌素(Gastrin)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體GPR89A蛋白抗體IQCG IQCG蛋白抗體
二氧化硫脲 98%大鼠胃動素受體(MTLR)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體GPRSP2蛋白抗體IQCF1 IQCF1蛋白抗體
硫脲 AR,99%大鼠胃動素(MTL)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體GPRC5C蛋白抗體IQCE IQCE蛋白抗體
二化雙(三環(huán)己膦)鎳(II) 97%大鼠胃蛋白(PG)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體結合蛋白α14/Gα 14 抗體IQCD IQCD蛋白抗體
三正丁氧化膦 95%大鼠K1(VK1)免疫試劑盒G蛋白β樣蛋白抗體IQCC IQCC蛋白抗體
97%大鼠E(VE)免疫試劑盒G蛋白β5/Gβ 5 抗體IQCA1 IQCA1蛋白抗體
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