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商品介紹：

測(cè)定意義

AKP/ALP是一種含鋅的糖蛋白酶，在堿性環(huán)境中可水解各種天然及人工合成的磷脂單酯化合物。AKP/ALP廣泛分布于人體各臟器中，以肝臟為主。

測(cè)定原理：

在堿性環(huán)境中，AKP/ALP催化磷酸苯二鈉生成游離酚；酚與4-氨基林和反應(yīng)紅色亞醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通過測(cè)定510 nm吸光度增加速率，來計(jì)算AKP活性。

自備儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

硝酸鋁,九水 99.99% metals basis二氫 99%ECF ELISA Kit  大鼠嗜酸粒趨化因子

硝酸鋁 九水合物  ACS, ≥98% CP，>98.5% (GC)EG-VEGF ELISA Kit  大鼠腺來源的血管內(nèi)皮生長因子

鋁 CP異喹啉羧酸 98%1,3- BetaD-Glu ELISA Kit  大鼠1,3-βD葡葡糖苷

草酸銨 AR,99.8%1-甲基-3-酸 97%CD30 ELISA Kit  大鼠CD30分子

草酸銨 CP,99.5%2-甲基啉 99%E-Cad ELISA Kit  大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白

草酸銨 GR,99.8%-3-羧酸甲酯 99%BTC ELISA Kit   大鼠β素

草酸銨 99.997% metals basis3-甲基喹啉 98%ANG-2 ELISA Kit  大鼠血管生成素2

草酸銨 ACS, ≥99% N-甲基二苯 98%ANG-1 ELISA Kit  大鼠血管生成素1

堿性磷酸酶（AKP/ALP）微量法檢測(cè)試劑盒中代類混合標(biāo)樣代類:、1, 2－二、1, 4－二突觸結(jié)合蛋白12抗體

一二溴標(biāo)準(zhǔn)溶液分析標(biāo)準(zhǔn)品,溶劑:大腸桿菌志賀樣素Ⅱ型突變體（O139菌型）抗體

代類：、1,2－二、1,3－二、1,4－二、1,2,4泛素連接Siah1抗體

鄰二二酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體

鄰二二酯標(biāo)準(zhǔn)溶液5000μg/ml，溶劑：化5-脂氧合抗體

鄰二二丁酯標(biāo)準(zhǔn)溶液200μg/ml，溶劑：化5-脂氧合抗體

2,6-二酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體

對(duì)二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：抗腫瘤蛋白ANUP抗體

對(duì)二標(biāo)準(zhǔn)溶液溶劑：小谷氨酰三角四肽重復(fù)區(qū)蛋白α抗體

2,4-二硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：SUGT1蛋白抗體

鄰二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白3抗體

中1,2－二標(biāo)樣 濃度范圍:1034±18ug/ml，分析標(biāo)準(zhǔn)品 紡錘體和著絲粒相關(guān)蛋白2抗體

間二標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑：轉(zhuǎn)錄因子蛋白SIM1抗體

間二標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品，體：核轉(zhuǎn)錄因子SOX14抗體

鄰二二正辛酯標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，體：信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。