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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>酯酶系列>> ATP含量微量法檢測(cè)試劑盒
羧酸酯酶(CarE)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6548 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6548 |
商品介紹:
測(cè)定意義
ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。
測(cè)定原理:
肌酸激酶催化肌酸和ATP反應(yīng)生成磷酸肌酸,可在700nm下用磷鉬酸比色法檢測(cè)磷酸肌酸含量,以此反應(yīng)ATP含量。
自備儀器和用品:
分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液槍、微量石英比色皿/96孔板、研缽和蒸餾水。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
有絲分裂周期蛋白MPP9抗體Human ODAM ELISA Kit白屈菜紅堿
減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Human NXN ELISA Kit樟腦
肌球蛋白相互作用G蛋白交換因子抗體Human ODF2 ELISA Kit莰烯
珠蛋白1抗體Human ODF1 ELISA Kitβ-連環(huán)蛋白抗體流式組化
間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體Human ODF3 ELISA Kit
G蛋白偶聯(lián)受體MRGX1抗體Human NXN ELISA Kit磷酰二肽
黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體Human ODF2L ELISA KitN-乙酰-L-
G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體Human HSP90AA1(Heat shock protein HSP 90-alpha) ELISA Kit2"-O-沒(méi)食子?;鸾z桃苷
ATP含量微量法檢測(cè)試劑盒β-環(huán)糊精 96%IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11豚鼠補(bǔ)體因子4 (C4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2- 98%IGFBP-4 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4豚鼠神經(jīng)粘附分子(NCAM/CD56)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
吡-2,3-二羧 97%IGFBP-3 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3豚鼠多巴受體D2(D2R/DRD2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
3- 98%VEGF-D ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子D豚鼠cGMP依賴性蛋白激I (PRKG1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,3,5-吡 99%IGFBP-2 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2豚鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
7-氨 97%IGFBP-1 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1豚鼠蛋白激C(PKC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2-并咪唑乙 97%VEGFR-1/Flt1 ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1豚鼠/抗復(fù)合物(TAT)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5-溴-7-硝二氫 98%VEGFR-2/Flk-1 ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2豚鼠多形核白彈性蛋白(PMN Elastase)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5-溴代 98%HGF ELISA Kit 大鼠肝生長(zhǎng)因子豚鼠膽固調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白(SREBP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
4-溴 98%gp130 ELISA Kit 大鼠糖蛋白130豚鼠血小板激活因子ib3(PAFAHIB3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5- 99%GH ELISA Kit 大鼠生長(zhǎng)激素豚鼠雙皮質(zhì)激素樣激1(DCLK1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
5--1,3,3--2-亞啉 90%G-CSF ELISA Kit 大鼠粒集落激因子豚鼠硫氧化還原蛋白(Trx)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
7-喹哪 99%NAP-2/CXCL7 ELISA Kit 大鼠中性粒趨化蛋白2豚鼠半凝集素8(GAL8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2-()并咪唑 96%Flt3 ELISA Kit 大鼠FMS樣酪氨激3豚鼠可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(sFMC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
1,2-二 99%Flt3L ELISA Kit 大鼠FMS樣酪氨激3配體豚鼠CD163分子(CD163)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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