當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 檸檬酸(CA)含量微量法檢測試劑盒
貨號 | GOY-01S6573 |
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【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6573 |
商品介紹
測定意義 CA又稱枸櫞酸,廣泛存在于各種生物胞質中,是生物體內重要的有機酸。CA也存在于線粒體基質中,是三羧酸循環(huán)第一步反應的產物,與脂肪、蛋白質和糖最終轉化為二氧化碳密切相關。 測定原理 酸性條件下,檸檬酸可將Cr6+還原成Cr3+,在545nm處有特征吸收峰;通過測定545nm吸光值的增加,即可計算出樣品中檸檬酸含量。 實驗中所需儀器及設備 可見分光光度計、低溫離心機、掌上離心機、可調式移液槍、1ml玻璃比色皿、雙蒸水 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
Burkholderia gladioli氨肽N檢測試劑盒
Pseudomonas nitroreducens內皮微粒水平檢測試劑盒
Pseudomonas chlororaphis神經酰檢測試劑盒
Pseudomonas fulva前腦鈉素檢測試劑盒
Burkholderia pyrrocinia緊密連接蛋白2檢測試劑盒
Pseudomonas viridiflava轉化生長因子P1檢測試劑盒
Pseudomonas cichorii乙脫氫1家族成員A2檢測試劑盒
Pseudomonas putida神經生長因子前體檢測試劑盒
檸檬酸(CA)含量微量法檢測試劑盒正辛 AR,99%TRBF1 (omeric repeat binding factor 1) 端粒體復制結合因子1抗原猴組織蛋白D(CTSD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
1,2- AR,99%TRIM32(tripartite motif protein 32) TRIM32抗原猴原纖維蛋白3(FBN3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
紅鋁溶液 70 wt%溶液Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原猴腦源性神經營養(yǎng)因子(BDNF) 聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氫化鈉 98%TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精凋亡相關因4抗原猴可溶性轉鐵蛋白受體1(sTfR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三乙烯四 Standard for GCTSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性腫瘤特異性生長因子抗原猴回腸脂肪結合蛋白6(FABP6)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三乙烯四 CP,68%CIDEB peptide CIDEB抗原猴趨化素樣因子超家族成員5(CKLFSF5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三乙烯四 AR,70%Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原猴質金屬蛋白7(MMP-7)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三乙烯四 色譜固定液TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促狀腺素受體抗原猴REST協(xié)阻抑因子3(RCOR3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三異 95%MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關蛋白輕鏈3抗原猴D-脫氫(D-LDH)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,5,5-己 97%TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌腫瘤阻抑因1抗原猴肝脂 (LIPC)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三羥烷 98%TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 狀腺核轉錄因子-1抗原猴生長分化因子2(GDF2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
3,4,5,6-四氫酐 98%Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原猴過氧化還原5(PRDX5)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
己二 98%TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原猴紐蛋白(VCL)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
三硅烷 98%T Beta10 peptide β10抗原猴信號傳導轉錄激活因子4(STAT4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
六亞二異酯 97%UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)猴C-Myc結合蛋白(MYCBP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
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