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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 乳酸含量(LA)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6588 |
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選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測(cè)方法 | 可見分光光度法 |
貨號(hào) | GOY-01S6588 |
商品介紹:
測(cè)定意義
乳酸是生物體代謝過程中重要的中間產(chǎn)物,與糖代謝、脂類代謝、蛋白質(zhì)代謝及細(xì)胞內(nèi)能量代謝密切相關(guān),乳酸含量是評(píng)估糖元代謝的和有氧代謝的重要指標(biāo)。
測(cè)定原理
乳酸在乳酸脫氫酶的作用下生成丙酮酸,同時(shí)使NAD+還原生成NADH和H+,H+傳遞給PMS生成的PMSH2還原INT生成紅色物質(zhì),在530nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
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血紅素氧合-1/熱休克蛋白-32抗原Anti-COL6A2 Antibody豬食欲素/阿立新B(OXB)elisa定量檢測(cè)試劑盒
血紅素氧合-2抗原Anti-COL9A1 Antibody猴肝脂 (LIPC)elisa定量檢測(cè)試劑盒
異染色質(zhì)蛋白1(化多肽)Anti-COL9A3 Antibody猴微管蛋白α3C(TUBα3C)elisa定量檢測(cè)試劑盒
異染色質(zhì)蛋白1(化多肽)Anti-COP1 Antibody豬基質(zhì)衍生因子4(SDF-4)elisa定量檢測(cè)試劑盒
人類狀瘤病18E6Anti-Collagen XII alpha1 Antibody豬c-junelisa定量檢測(cè)試劑盒
乳酸含量(LA)可見分光光度法檢測(cè)試劑盒茜素黃R 98%人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試劑盒補(bǔ)體C1RL鏈多肽抗體phospho-EIF4G1(Ser1238) 化真核翻譯起始因子4G抗體
依來鉻藍(lán)R >99%(HPLC)人核糖體蛋白S9(RPS9)免疫試劑盒周期素M2抗體phospho-eIF4G(ser1108) 化真核翻譯起始因子4G抗體
鉻黑T ACS人核糖體蛋白S25(RPS25)免疫試劑盒周期素T2抗體phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser65/Thr70) 化eIF4E結(jié)合蛋白抗體
依萊鉻紅B 高純級(jí)人核糖核抑止劑(RNH1/PRI/RNH)免疫試劑盒周期素K抗體phospho-eIF4EBP1/4EBP1(Ser64) 化4E結(jié)合蛋白1抗體
鉻藍(lán)黑R AR人核糖核,核糖核A家族,(肝臟,嗜性粒源性神經(jīng)素)(RNASE2)免疫試劑盒抗菌肽CAMP抗體phospho-eIF4EBP1/2/3(Thr36) 化4E結(jié)合蛋白1,2,3抗體
鉻藍(lán)黑R Indicator人核糖核(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫試劑盒5號(hào)染色體開放閱讀框4抗體phospho-eIF4EBP1(Thr37/46) 化4E結(jié)合蛋白1抗體
芐氫氧化銨 40%溶液人核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)免疫試劑盒4號(hào)染色體開放閱讀框44抗體phospho-eIF4EBP1(Thr36) 化4E結(jié)合蛋白1抗體
四乙氫氧化銨 AR,25%水溶液人核質(zhì)蛋白22(NMP-22)免疫試劑盒4號(hào)染色體開放閱讀框33抗體phospho-EIF4EBP1(Ser111) 化eIF4E結(jié)合蛋白抗體
四丁氫氧化銨溶液 ~25% in H2O (~0.8 M)人核黃素激(RFK)免疫試劑盒4號(hào)染色體開放閱讀框42抗體phospho-EIF4EBP1(Ser100) 化eIF4E結(jié)合蛋白抗體
石英砂 AR,6-10目,2-3mm人和肽素(copeptin)免疫試劑盒5號(hào)染色體開放閱讀框33抗體phospho-eIF4E(Ser209) 化真核翻譯起始因子4E抗體
石英砂 AR,8-16目或1-2mm人漢坦病(HV)抗體(IgM)免疫試劑盒9號(hào)染色體開放閱讀框89抗體phospho-EIF4B (Ser540) 化真核翻譯起始因子4B抗體
2-氨吡 CP人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激2(Tie-2)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框66抗體phospho-EIF4B (Ser422) 化真核翻譯起始因子4B抗體
酯 99%人含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(zhǎng)因子樣域酪氨激1(Tie-1)免疫試劑盒21號(hào)染色體開放閱讀框55抗體Phospho-eIF2 alpha (Ser51) 化真核啟動(dòng)因子2α抗體
氨黑10B AR人含SET域4(setd4)免疫試劑盒21號(hào)染色體開放閱讀框70抗體Phospho-EGFR(Tyr845) 化因子受體抗體
石杉?jí)A 99%人含patatin樣脂域3(PNPLA3/ADPN/C22orf20)免疫試劑盒胱抑素A/半胱氨蛋白抑制劑A抗體Phospho-EGFR(Ser991) 化因子受體抗體
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