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選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:魚腎上腺素(EPI)elisa試劑盒
英文名稱:Fish epinephrine/adrenaline,EPI ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
N-(2-氨乙基)甘氨酸 24123-14-6克草猛標(biāo)準品 號: 1114-71-2 100mg免疫球蛋白M(IgM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
N-(2-氨乙基)甘氨酸 24123-14-6戊菌唑 標(biāo)準品 號:66246-88-6 100mg內(nèi)皮素1(EDN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
3,5-二芐氧基苯甲 24131-31-5戊菌隆 標(biāo)準品 號:66063-05-6 100mg緩激肽(BK)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>97.0%(GC)
3,5-二芐氧基苯甲 24131-31-5硝草胺 標(biāo)準品 號:40487-42-1 100mg髓鞘堿性蛋白(MBP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>97.0%(GC)
3,5-二芐氧基苯甲 24131-31-5嘧啶并三唑類磺胺 標(biāo)準品 號:219714-96-2 1ml神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)>97.0%(GC)
乙鎂 2414-98-4-5 2ml瘦素(LEP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
乙鎂 2414-98-4氯菊酯(順反異構(gòu)體混合物) 標(biāo)準品 號:52645-53-1 250mg抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
三(2-噻吩基)膦 24171-89-9苯敵草 標(biāo)準品 號:13684-63-4 100mg細胞間粘附分子1(ICAM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98+%
三(2-噻吩基)膦 24171-89-9苯菊酯 標(biāo)準品 號:26002-80-2 100mg細胞間粘附分子2(ICAM2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98+%
4-(溴甲基)苯甲酸甲酯 2417-72-3苯氧甲基青霉素(鹽) 標(biāo)準品 號:132-98-9 250mg纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
4-(溴甲基)苯甲酸甲酯 2417-72-3 標(biāo)準品 號:2597-O3-7 100mg內(nèi)皮素1(EDN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
4-(溴甲基)苯甲酸甲酯 2417-72-3 標(biāo)準品 號:298-02-2 100mg纖溶酶原激活物抑制因子2(PAI2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
N(e)-Boc-L-賴氨酸 2418-95-3伏殺硫磷 標(biāo)準品 號:2310-17-0 100mg蛋白C(PROC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
N(e)-Boc-L-賴氨酸 2418-95-3 標(biāo)準品 號:732-11-6 100mg血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
N(e)-Boc-L-賴氨酸 2418-95-3 標(biāo)準品 號:13171-21-6 100mg過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
小鼠組織因子(TF)ELISA Kit,48T/96T 用途: 研究
豬組織因子(TF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Gulbenkiania sp.
大鼠組織因子(TF)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 200ug/ml*1ml/支
兔子組織因子(TF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Pythium aphanidermatum
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: scabra
小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA Kit,48T/96T 注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces roseorubens
大鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Deinococcus yunweiensis
魚腎上腺素(EPI)elisa試劑盒1-Phenyl-1-butyne,99%多肽試劑 5G
Phenylacetylene,≥98.0%多肽試劑 25ML
(4-Bromophenyl)acetylene,≥97.0%表面活性劑 250MG
3-Cyclohexyl-1-propyne ,≥97.0%表面活性劑 1G
Propargyl bromide solution ,>80.0%表面活性劑 25G
1-Heptyne ,≥98.0%表面活性劑 5ML
4-Octyne,≥99.0%表面活性劑 5ML
1-Octyne表面活性劑 10ML
1-Bromo-2-butyne ,≥99.%表面活性劑 1G
1,4-Bis(trimethylsilyl)butadiyne,≥98.%表面活性劑 1G
Bis(trimethylsilyl)acetylene ,≥98%表面活性劑 10ML
1-Hexyne表面活性劑 10ML
3-Methyl-1-pentyn-3-ol ,>98.%表面活性劑 25ML
Ethynyltrimethylsilane ,≥98.0%通用試劑 5ML
1,4-Dichloro-2-butyne ,≥99表面活性劑 5G
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準。
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