您好, 歡迎來到儀表網(wǎng)! 登錄| 免費(fèi)注冊(cè)| 產(chǎn)品展廳| 收藏商鋪|
當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 甲基檸檬酸合酶(MCS)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6591 |
---|
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6591 |
商品介紹
測(cè)定意義 MCS廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體基質(zhì)中,與檸檬酸合酶(CS)共同參與三羧酸循環(huán)的調(diào)節(jié)。 測(cè)定原理: MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸產(chǎn)生甲基檸檬酰,進(jìn)一步水解產(chǎn)生甲基檸檬酸;該反應(yīng)促使無色的DTNB轉(zhuǎn)變成黃色的TNB,在 412nm處有特征吸光值。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
Sporobolomyces roseusⅤ檢測(cè)試劑盒
Sporobolomyces elongatusⅩ檢測(cè)試劑盒
Kurtzmanomyces nectaireiβ淀粉樣蛋白1-40抗體檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae犬尿喹啉酸檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae3-羥基犬尿檢測(cè)試劑盒
Mrakia frigida8-羥-2去氧鳥苷檢測(cè)試劑盒
Mrakia gelida色素cyp1a2檢測(cè)試劑盒
Mrakia nivalis色素cyp2e1檢測(cè)試劑盒
甲基檸檬酸合酶(MCS)微量法檢測(cè)試劑盒銥 Ir 35% in HCl人組織蛋白L1(CTSL1/CTSL)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白62抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/FITC FITC標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
二氧化銥 Ir 86%人組織蛋白K(cath-K)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白64抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
銥粉 99.99% metals basis人組織蛋白H(CTSH)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白72抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
銥粉 99.9% metals basis人組織蛋白G自身抗體(Cath G Ab)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白73抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
三化銥 試劑級(jí),Ir>52%人組織蛋白G(cath-G)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白74B抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
四化銥(IV) 水合物 Ir 48.0 - 55.0 %人組織蛋白D(cath-D)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框25抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Bio 標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
亞鉑 AR人組織蛋白C(CTSC)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框42抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
醋鈀 AR,Pd 46.0 - 48.0 %人組織蛋白B(CTSB)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框44抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/AP 堿性(AP)標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
氧化鈀 Pd ≥85% 人組蛋白乙酰化(HAT)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框48抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
無水氧化鉑 鉑含量≥85.4% 人組蛋白脫乙?;?(HDAC2)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框50抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
硝鉑溶液 Pt, 15%人組蛋白去乙酰化3(HDAC3)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框51抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
化鈀 Pd 59-60%人組蛋白去乙酰化(HDAC)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框52抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2
硝鈀(II) 水合物 Pd ≥39.0%人組蛋白賴氨N-轉(zhuǎn)移SETD7(SETD7)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框55抗體Rabbit anti-human IgG F(ab')2 whole serum 兔抗人IgG F(ab')2抗血清
鈀粉 99.9% metals basis,粒徑0.5μm人組蛋白H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框56抗體Rabbit Anti-human IgG F(ab')2 兔抗人IgG F(ab')2
硫鈀 Pd 51.2%-53.9%人組蛋白H2b(histon-H2b)免疫試劑盒19號(hào)染色體開放閱讀框57抗體Rabbit Anti-human IgG 兔抗人IgG
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
請(qǐng)輸入賬號(hào)
請(qǐng)輸入密碼
請(qǐng)輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。