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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>三羧酸循環(huán)系列>> 順烏頭酸酶(ACO)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6595 |
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測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6595 |
商品介紹
測(cè)定意義 順烏頭酸酶(aconitase),三羧酸循環(huán)中的酶,催化檸檬酸轉(zhuǎn)變?yōu)楫悪幟仕?。檸檬酸本身不易氧化,在順烏頭酸酶作用下,通過脫水與加水反應(yīng),使羥基由β碳原子轉(zhuǎn)移到α碳原子上,生成易于脫氫氧化的異檸檬酸,為進(jìn)一步的氧化脫羧反應(yīng)作準(zhǔn)備。 測(cè)定原理 ACO催化檸檬酸轉(zhuǎn)化成異檸檬酸,異檸檬酸氧化脫羧將NAD+ 還原生成NADH,導(dǎo)致340nm處光吸收上升。 需自備的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
FNBP1L蛋白抗體Human ACCS (1-aminocyclopropane-1-carboxylate synthase-like protein 1) ELISA KITP物質(zhì)抗體流式組化
GATA結(jié)合蛋白2伴侶蛋白抗體Human SREBF2(Sterol regulatory element-binding protein 2) ELISA Kit抗spindly抗體流式組化
CD349抗體Human ABHD12 (Monoacylglycerol lipase ABHD12) ELISA KIT炎癥負(fù)調(diào)控因子蛋白抗體流式組化
FISH蛋白抗體Human ASCL1 (Achaete-scute homolog 1) ELISA KIT促甲狀腺素受體抗體流式組化(N端)IHC WB
脂肪酸脫氫2抗體Human ABRA (Actin-binding Rho-activating protein) ELISA KIT肺癌腫瘤阻抑基因1抗體流式組化
法尼基二法尼基轉(zhuǎn)移1/鯊烯合成抗體Human HTR1D (5-hydroxytryptamine receptor 1D) ELISA KIT纖維素(綠色木霉)
叉頭蛋白D3抗體Human ACTL9 (Actin-like protein 9) ELISA KITα-萘乙酸鉀
叉頭蛋白B1抗體Human ACTL8 (Actin-like protein 8) ELISA KIT鳥苷
順烏頭酸酶(ACO)微量法檢測(cè)試劑盒硫鋅,一水 Zn≥ 35.5%Rabbit Anti-Guinea IgM/Gold 金標(biāo)記兔抗豚鼠IgM (10nm/15nm)豬TATA框結(jié)合蛋白/TBP相關(guān)因子(TAF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
-3- 97%Rabbit Anti-MK IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗猴IgG(10nm/15nm)豬癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
化鋯 ≥99.99% metals basisRabbit Anti-rat IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗大鼠IgG(10nm/15nm)豬狀腺激免疫球蛋白(TSI)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
二硅油 用于油浴,180°CRabbit Anti-mouse IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗小鼠IgG(10nm/15nm)豬遲現(xiàn)抗原(VLA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 AR,99%Rabbit Anti-pig IgG/Gold 金標(biāo)記兔抗豬IgG(10nm/15nm)豬可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體1(sTfR1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 CP,99%Avidin/Gold 金標(biāo)記親合素(10nm/15nm)豬前列腺素F受體(FP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 電子級(jí)Streptavidin/Gold 金標(biāo)記鏈霉親和素(10nm/15nm)豬音猬因子(SHH )聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 99.999% metals basisRecomb Protein G/Gold 膠體金標(biāo)記重組蛋白G(10nm/15nm)豬血小板膜糖蛋白VI(GP6)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 SPRecomb Protein A/Gold 金標(biāo)記重組蛋白A(10nm/15nm)豬腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL/TNFSF10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 99.99% metals basisGoat Anti-Bovine IgG 羊抗牛IgG (親和層析純化)豬半凝集素3(GAL3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 分析標(biāo)準(zhǔn)品,絡(luò)合量:12.280mmol/gGoat Anti-Mouse IgG 羊抗小鼠IgG (免疫親和層析純化)豬肝生長(zhǎng)因子(HGF)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
氧化鋅 藥典級(jí)(Ph. Eur., BP, USP, 99-100.5%)Goat Anti-Mouse IgM 羊抗小鼠IgM (親和層析純化)豬STAT蛋白抑制因子3(PIAS3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
四丁氟化銨,三水 90%Goat Anti-rat IgG 羊抗大鼠IgG (親和層析純化)豬巨噬集落激因子受體(MCSFR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
四丁乙銨 97%Goat Anti-Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG (親和層析純化)豬D-二聚體(D2D)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
乙鈉,三水 AR,99%Goat Anti-rabbit IgG 羊抗兔IgG (親和層析純化)豬β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
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