當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>氧化與抗氧化系列>> 葡萄糖氧化酶(GOD)可見分光光度法
貨號 | GOY-01S6418 |
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操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 50管/24樣 |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
貨號 | GOY-01S6418 |
商品介紹:
測定意義
GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。
測定原理:
GOD催化產(chǎn)生H2O2,過氧化物酶在有氧存在時催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。
試驗中所需的儀器和設(shè)備:
可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。
實驗方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
油酸 98%DL-N-乙酰高半胱硫內(nèi)脂 99%IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1
3-苯基酚 97%DL-半胱 97%IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子2
8-喹啉磺酰氯 98%DL-高胱 98%IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長因子1
2,6-二羥基喹啉 90%DL-高半胱硫內(nèi)脂鹽酸鹽 98%IFN- Gamma(Human Interferon Gamma) ELISA Kit 人γ干擾素
(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二苯基膦基)二茂鐵基]乙 98%N-苯基甘 97%ICAM-1/CD54(Human intercellular adhesion molecule 1) ELISA Kit 人間粘附分子1
1-庚烷磺酸鈉 98%,離子色譜級四氮唑乙酸 98%HGF(Human hepatocyte growth factor) ELISA kit 人肝生長因子
1-己烷磺酸鈉 離子色譜級,98%氮化鈦 99.5%,2-10 μmGM-CSF(Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) ELISA Kit 人粒巨噬集落激因子
十二烷基磺酸鈉 離子對色譜氫鈣 AR,99.0 %GDNF(Human glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA KIT 人膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子
葡萄糖氧化酶(GOD)可見分光光度法標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/m,u=6~2%,酮 Anti-MMP-2/RBITC 紅色羅丹明標(biāo)記質(zhì)金屬蛋白-2抗體IgG豬載脂蛋白C3(ApoC3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
嘧螨酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.6%Anti-XIAP/FITC 熒光素標(biāo)記X-連鎖凋亡蛋白/性連鎖凋亡抑制蛋白抗體IgG豬血管緊張素II (ANG II)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
熱必斯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.3%Anti-XRCC1/FITC 熒光素標(biāo)記X射線修復(fù)交叉互補蛋白/堿切除修復(fù)因抗體IgG豬腎小球組織糖化終末產(chǎn)物(GTEAGE)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氟喹唑 分析標(biāo)準(zhǔn)品,97.5%Anti-YBX-1/FITC 熒光素標(biāo)記高保留轉(zhuǎn)錄因子抗體IgG豬N-乙酰β-D-氨葡萄糖苷(NAGase)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
雙氟磺草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%Anti-YY1/FITC 熒光素標(biāo)記核轉(zhuǎn)錄因子YY1抗體IgG豬解整合素金屬蛋白10(ADAM10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
alpha-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%Anti-ZAP-70/FITC 熒光素標(biāo)記zeta相關(guān)蛋白70抗體IgG豬脫氧核糖核I(DNase-I)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
alpha-六六六標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6%Anti-ZCWCC1/FITC 熒光素標(biāo)記ZCWCC1抗體IgG豬Ⅲ型膠原(COL3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
惡霉靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%Anti-Z-DEVD-FMK/FITC 熒光素標(biāo)記PASE3凋亡抑制劑IgG豬雷帕霉素靶蛋白(mTOR)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
氟鈴脲 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99%Anti-Zfp91/FITC 熒光素標(biāo)記白血病相關(guān)新因抗體IgG豬促睡眠肽α(δSIP-α)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
環(huán)酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%Anti-ZNF217/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白217抗體IgG豬甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨蛋白1(MASP1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
吡嘧磺隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Anti-ZNF268(1a)/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白-1a抗體IgG豬CCAAT增強子結(jié)合蛋白δ(C/EBPδ)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
噻螨酮 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%Anti-ZNF268(1b)/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白-1b抗體IgG豬C型鈉尿肽(CNP)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=3%Anti-ZNF268(1c)/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白-1c抗體IgG豬普列克底物蛋白同源物樣結(jié)構(gòu)域家族A成員2(PHLDA2)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
噻螨酮標(biāo)準(zhǔn)溶液 10μg/ml,u=6%Anti-ZNF300 /FITC 熒光素標(biāo)記鋅指蛋白300抗體IgG豬粘蛋白5B(MUC5B)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
七標(biāo)準(zhǔn)溶液 100μg/ml,u=2(劇品)Anti-ZNF307/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指蛋白307抗體IgG豬XV 型膠原(COL15)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒
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