實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
吲哚(>98%,BR)Smad2/3 Antibody Sampler Kit2,5-二甲基-2,5-二(叔丁基過氧基)己烷

硫酸鋰(>98%,BR)Pan-Actin (D18C11) Rabbit mAb (HRP Conjuga)三羥甲基硝烷

硫柳汞鈉鹽LRIG1 Antibody三氟溴

硅粉(>99%，BR)K252a內(nèi)向-氨基-9-甲基-9-氮雜雙環(huán)[3,3,1]壬烷

油酸鈉(>98%,BR )SignalFire™ Eli ECL Reagent甲基*基硅烷

四甲基化銨(>99%,BR)SignalFire™ Eli ECL Reagent1-溴--2-甲基烷

1-辛烷磺酸鈉(>98%,BC )Thapsigargin(S)-2-甲基-CBS-惡唑烷

2,3,5*酸(>97%,植物激素級)SMARCC2/BAF170 (D8O9V) Rabbit mAbS-(-)-1,2-環(huán)氧烷

吲哚丁酸(>98%,植物激素級)SHMT2 Antibody4,二異酸酯二環(huán)己烷

酸鈣一水(>98%,BR)SignalSilence® AUF1/hnRNP D siRNA I1,二溴-2,2-二甲氧基烷

酸三鈣(>98%,BR)PiT1/SLC20A1 (D1Z4X) Rabbit mAb二溴二氟

DL-硒代蛋氨酸(USP)RBBP5 (D4Y7R) Rabbit mAb1,2-二(二基膦基)烷

蜜二糖DMF (Dimethylformamide)二

草酸鈉(>98%，BC)Cleaved Caspase-3 (Asp175) (D3E9) Rabbit mAb (PE Conjuga)二基

鎢酸鈉二水(>98%,BR)SimpleChIP® Human tRNA-Leu Anti-Codon (TAG) Primers兒茶酚烷

丁二酸酐(>98%,BR)S-Tag (D2K2V) XP® Rabbit mAb(S)-2-(氨甲基)-1-基吡咯烷

四基化銨(>98%,BR)Malachi Green Phospha Dection Kit1-氧基-1-*硅氧基環(huán)烷

吐溫60FGF Receptor 1 (D8E4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)(S)-氨基吡咯烷
魚卵黃高磷蛋白(PV)elisa試劑盒人前列腺成纖維細(xì)胞，HPFTR細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

人前列腺上皮細(xì)胞，HPECGD細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

人前脂肪細(xì)胞，HPTR細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

人韌帶成纖維細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

人成纖維細(xì)胞，HMFGD細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶

人導(dǎo)管上皮細(xì)胞5 x 10^5 cells/T25培養(yǎng)瓶
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。