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多酚氧化酶(PPO)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-24 15:11:36瀏覽次數(shù):182次

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生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
貨號(hào) GOY-01S6420
多酚氧化酶(PPO)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:人催乳素(PRL)ELISA Kit,48T/96T
小鼠催乳素(PRL)ELISA Kit,48T/96T
大鼠催乳素(PRL)ELISA Kit,48T/96T
兔子催乳素(PRL)ELISA Kit,48T/96T
人抵抗素(Resistin)ELISA Kit,48T/96T

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商品屬性:

產(chǎn)品名稱

多酚氧化酶(PPO)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒

規(guī)格

50管/24樣

檢測(cè)方法

可見(jiàn)分光光度法

貨號(hào)

GOY-01S6420

商品介紹:

測(cè)定意義

PPO(EC1.10.3.1)主要存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是一種含銅的氧化酶,能使一元酚和二元酚氧化產(chǎn)生醌,從而引起褐化,與果蔬加工、茶葉品質(zhì)和組培等密切相關(guān)。

測(cè)定原理:

PPO能夠催化鄰苯二酚產(chǎn)生醌,后者在525nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血35ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔510分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置12小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

人堿性成纖維生長(zhǎng)因子6Anti-OR5A1 Antibody人多功能蛋白聚糖(VS)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠CD19分子Anti-OR5AK3P Antibody人多巴脫羧(DDC)elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1Anti-OR5A2 Antibody人低氧誘導(dǎo)因子1α (HIF-1α)elisa定量檢測(cè)試劑盒

人堿性成纖維生長(zhǎng)因子4Anti-OR5AP2 Antibody人骨保護(hù)素(OPG)elisa定量檢測(cè)試劑盒

人酸性成纖維生長(zhǎng)因子1Anti-OR5AK3P Antibody人蛋白二硫化物異構(gòu)A2(PDIA2)elisa定量檢測(cè)試劑盒

大鼠內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素Anti-OR5AP2 Antibody人蛋白Z(PROZ)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠CD3分子Anti-OR5AR1 Antibody人胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體3(IGF1R3)elisa定量檢測(cè)試劑盒

小鼠CD4分子Anti-OR5AS1 Antibody人丙酮酸脫氫激同工4(PDK4)elisa定量檢測(cè)試劑盒

多酚氧化酶(PPO)可見(jiàn)分光光度法檢測(cè)試劑盒 98%大鼠狀旁(PTH)免疫試劑盒神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43hnRNP F  異質(zhì)核糖核蛋白F抗體

2-氨-5-硝-6-吡  98%大鼠種胎兒球蛋白/胎蛋白(AFP)免疫試劑盒3-甘油脫氫(兔來(lái)源免疫組化用抗體)hnRNP A2B1  異質(zhì)核糖核蛋白hnRNPA2抗體

2-氨-3-硝-6-吡  98%大鼠羥戊5-焦脫羧(MDD)免疫試劑盒3-甘油脫氫單克隆抗體(內(nèi)參抗體)HNF4/TCF4/HNF4A  肝核因子4α抗體

2-溴-4-氨吡 97%大鼠低密度脂蛋白(VLDL)免疫試劑盒生長(zhǎng)停滯特異性蛋白2家族1抗體HNF1/TCF1/HNF1A  肝核因子1α抗體

5-氨-2-吡 98%大鼠激肽原(KNG)免疫試劑盒G蛋白偶聯(lián)受體97抗體HN1L  雄激素調(diào)節(jié)樣蛋白抗體

4-氨-2-吡 98%大鼠激動(dòng)異構(gòu)/分裂素MB(CKMB)免疫試劑盒G蛋白結(jié)合蛋白7抗體HN1/ARM2  雄激素調(diào)節(jié)蛋白2抗體

3-氨-2-吡 97%大鼠質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)免疫試劑盒綠色熒光蛋白抗體HN protein  雞新城疫血凝素-神經(jīng)氨抗體

3,5-雙(三氟) 97%大鼠質(zhì)衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)免疫試劑盒綠色熒光蛋白抗體HMW Kininogen  高分子量激肽原重鏈抗體

2-溴-5-三氟 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子3(TIMP-3)免疫試劑盒G蛋白通路抑制蛋白1抗體HMGCS2  三羥輔A合成2抗體

對(duì)二三氟 99%大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子2(TIMP-2)免疫試劑盒膠質(zhì)系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α2抗體HMGCS1  三羥輔A合成1

5-溴-1-茚酮 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白抑制因子1(TIMP-1)免疫試劑盒核突觸蛋白-γ抗體HMGCR  三羥輔A還原抗體

N-芐哌酮 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白9/明膠B(MMP-9/Gelatinase B) 免疫試劑盒粒-巨噬克隆激因子抗體HMGCL  三羥輔A裂解抗體

 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白8/中性粒膠原(MMP-8/Collagenase II)免疫試劑盒還原抗體HMGB4  高遷移率族蛋白B4抗體

2--4-硝吡 98.0%大鼠質(zhì)金屬蛋白7(MMP-7)免疫試劑盒胰高血糖素樣肽-1抗體HMGB1  高遷移率族蛋白B1抗體

L-蘋果二酯 98%大鼠質(zhì)金屬蛋白5(MMP-5)免疫試劑盒顆粒蛋白前體抗體HMGA2  高遷移率族蛋白A2抗體

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。


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